【摘 要】
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目的：检测雌雄Ras转基因小鼠肝肿瘤组织蛋白质组表达差异,探讨肝肿瘤发生的性别差异机制.
方法：采用双向荧光差异凝胶电泳(Two Dimension Difference Gel Electrophoresis,
【机 构】
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大连医科大学实验动物中心,大连116044
【出 处】
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2017年第十五届中国北方实验动物科技年会
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目的：检测雌雄Ras转基因小鼠肝肿瘤组织蛋白质组表达差异,探讨肝肿瘤发生的性别差异机制.
方法：采用双向荧光差异凝胶电泳(Two Dimension Difference Gel Electrophoresis,2D-DIGE)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,MALDITOF-MS)技术检测H-ras12V雌雄小鼠肝肿瘤组织的蛋白质组差异表达谱,分离并鉴定差异表达蛋白,应用Western blot验证2D-DIGE结果,并对差异表达蛋白进行生物信息学分析,包括蛋白功能注释、分类(Gene Ontology,GO)分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析.
结果：经双向荧光差异凝胶电泳-图像分析得到1313个蛋白点,其中差异倍数≥1.5(P＜0.05)的蛋白点553个.从中选择94个差异蛋白点进行MALDI-TOF-MS鉴定,得到56种差异性表达的蛋白质.其中,与雌鼠相比,雄鼠肝肿瘤组织中高表达的蛋白有43种,低表达的蛋白有13种.选取4个差异蛋白点进行Western blot验证,证明了2D-DIGE结果的可靠性.GO分析结果显示,涉及雌雄鼠肝肿瘤组织中的差异蛋白在细胞组份、分子功能、生物学过程中的分布广泛.KEGG通路分析发现差异蛋白涉及9条信号通路.
结论：H-ras12V转基因雌雄小鼠肝肿瘤组织的差异性蛋白表达的检测结果为研究性别差异性肝癌发生的分子机制提供了基础生物学信息和有益的线索.
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