AQP3在HB-EGF介导的胚胎着床过程中的作用研究

来源 :广东省医学会第五次生殖医学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:reinhardwu
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  目的 探讨肝素结合表皮生长因子样生长因子(Heparin binding EGF-like growth factor,HB-EGF)是否可以诱导小鼠胚胎滋养层细胞侵袭子宫内膜;并研究其是否通过上调滋养层细胞水通道蛋白3(aquaporin 3,AQP3)的表达,从而达到增强小鼠胚胎滋养层细胞侵袭子宫内膜的能力.方法 1.建立小鼠囊胚与小鼠子宫内膜上皮细胞共培养模型,在培养模型中分A、B、C、D、E共5组,分别加入不同浓度的HB-EGF(0、10、20、50、100ng/ml),在倒置显微镜下观察统计各组胚胎滋养层细胞黏附及扩展的情况,比较胚胎黏附率、扩展率等与HB-EGF浓度的关系.2.Western blot法测定在A、B、C、D、E胚胎滋养层细胞AQP3的表达水平,分析其与HB-EGF是否有关联.3.对相同HB-EGF浓度(100ng/ml)共培养体系分a、b、c、d四组分别施加不同浓度的AQP3抑制剂CuSO4 (0、10、50、250umol/L),以既不添加HB-EGF也不添加CuSo4为空白对照,Western blot法检测各组AQP3的表达水平,并统计各组的黏附率与扩展率.结果 1.A、B、C、D、E五组胚胎黏附率不同(H=13,233,P<0.05)、胚胎扩展率也不同(H=13,500,P<0.05),且随着共培养系统中HB-EGF浓度的逐渐升高,胚胎黏附率逐渐升高(r=0.984,P<0.001),扩展率也逐渐升高(r=-0.964,P<0.001).2.A、B、C、D、E组胚胎滋养层细胞AQP3的蛋白表达水平不同(P<0.01),B、C、D、E组HB-EGF诱导AQP3的表达分别为A组的1.51、2.08、2.30、2.77倍,即随着HB-EGF浓度增大,AQP3表达量增大.3、a、b、c、d组与空白对照组AQP3表达水平不同(P<0.01),a、b、c、 d组分别为空白对照组的1.90、1.49、1.08、0.67倍.统计各组(空白对照、a、b、c、d)的胚胎黏附率不同(H=13.23、P<0.01),扩展率不同(H=12.433、P<0.05),且随着CuSO4浓度升高,黏附率与扩展率均呈下降趋势.结论 HB-EGF可以诱导囊胚滋养层细胞AQP3的表达上调,HB-EGF通过诱导AQP3的表达,从而增强胚胎对子宫内膜的侵袭能力,但其如何诱导AQP3表达上调的具体分子生物学机制以及AQP3如何增强胚胎侵袭子宫内膜还有待进一步研究.
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