卵黄抗体对鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠黏膜免疫的调节作用

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鼠伤寒沙门氏菌是肠杆菌科的兼性胞内寄生菌,感染后可引起食欲减退、呕吐、腹泻,严重者可造成死亡。卵黄抗体(Egg Yolkimmunoglobulin,IgY),是禽类经特定抗原免疫后产生并贮存在卵黄中的特异性抗体,可应用于动物感染性疾病的防治。目的:探索IgV对鼠伤寒沙门氏菌感染的防治效果。方法:以灭活的鼠伤寒沙门氏菌免疫蛋鸡制备特异性IgY,体外抑菌实验表明,特异性IgY能有效抑制病原菌的生长,浓度为20mg/ml时抑菌效果最明显。采用5 g/L链霉素预处理2天,0.4 m1 3×10~9CFU/ml浓度的鼠伤寒沙门氏菌灌胃攻毒4周龄的昆明小鼠,成功建立小鼠肠道感染模型。建立小鼠肠道感染模型24 h后,分别给予特异性IgY、非特异性IgY和PBS,期间观察小鼠的存活率和体重变化。持续3天后,处死并解剖小鼠,取小肠段,制作病理切片和超薄切片用于组织病理学检测和小肠上皮细胞超微结构的观察;ELISA法检测髓过氧化物酶(MPO)的含量以研究嗜中性粒细胞的活化和增殖状态。另外,免疫组织化学法检测空肠中T淋巴细胞及其亚型细胞数量的变化。结果:特异性IgY可以有效地降低感染小鼠的死亡率,增加小鼠的体重,且显著改善肠道的病理状态(如黏膜损伤、绒毛肿胀断裂等),有效缓解肠道炎性细胞浸润状态并保持小肠上皮细胞结构和细胞器的完整。另外,特异性IgY显著降低攻毒导致的MPO含量的升高(降低64%),显著缓解嗜中性粒细胞的过度激活和炎性浸润(P<0.05)。特异性IgV显著降低攻毒导致的T淋巴细胞(CD3)、辅助T淋巴细胞(CD4~+)、细胞毒性T淋巴细胞(CD8~+)和Tγδ淋巴细胞数量的显著增加(P<0.05),分别降低45%、50%、76%和25%。结论:特异性IgY有效改善鼠伤寒沙门氏菌肠道感染导致的病理状态,缓解肠道应激导致的炎症反应和肠道黏膜免疫应答的过度激活状态。
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