基于基质辅助激光解吸电离质谱成像技术分析皂苷的组织分布及对人参、三七、西洋参的鉴别

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参类被列为全世界最畅销的天然药物,其代表人参、三七、西洋参被广泛用与药品和食品中。皂苷是参类的主要有效成分[1],皂苷种类和含量的差别是不同参类药效和价格差异的主要原因[2]。在传统方法如液相色谱-质谱技术对不同品种、不同年限的参类进行鉴定过程中,一般涉及到复杂的样品准备,而且不能够提供人参皂苷在组织中的空间分布信息。在本文中,我们建立了基质辅助激光解吸电离质谱成像技术(MALDI-MSI)对人参组织切片进行直接分析,区分不同品种的参类、以及不同年限的人参的方法。在样品准备中,首先优化植物组织冷冻切片的温度和切片的厚度,根据优化结果,将样品在-18°C下制成厚度30μm的切片。其次对比常用于小分子检测的3种基质,根据皂苷峰的数量和强度选择2,5-二羟基苯甲酸(DHB)作为最佳基质。在基质喷涂过程中,通过优化基质喷涂循环的干燥程度、孵育时间,提升了皂苷检测灵敏度。最终通过质谱成像检测到18个皂苷峰对应于31种皂苷及在人参组织切片中的质谱成像图。与已经报道关于MALDI对人参分析相比,本研究中检测到的皂苷峰数量是最多的,显示了该方法的高灵敏度[3,4]。该方法对2,4,6年的人参分别进行数据采集,根据皂苷的质谱成像图,提取组织切片检测区域中皂苷分布集中部位的数据,进行多变量分析,成功区分了不同年限的人参,相比于传统需要提取的分析方法,更简单和准确(图1)。应用该方法对人参、三七、西洋参进行了分析,共检测到51种皂苷,能够显著区分了三种参类,并发现9个独特的离子可以作为区分三种参类的标记物。这种将应用MALDI-MSI,并在质谱成像的基础上进行数据分析的方法在中药的分析鉴定、药理研究等方面具有不错前景。
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