条斑紫菜多糖对肿瘤细胞株生长的影响

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研究用条斑紫菜多糖PY-D2,通过MTT法,对四种人肿瘤细胞株的生长进行观察和检测,并采用流式细胞仪检测肿瘤细胞的细胞周期变化。旨在确定条斑紫菜多糖对肿瘤细胞生长的抑制作用,并初步探讨其作用机理。应用紫菜叶状体破碎,酒精回流脂肪,抽滤,浓缩,脱蛋白,沉淀,冷冻干燥等步骤获得粗多糖,用DEAE-52离子交换层析分离和纯化获得条斑紫菜多糖的2个组分,分别为PY-D1和PY-D2,在体外培养条件下分别用不同浓度的条斑紫菜多糖PY-D2处理4种人肿瘤细胞(HO-8910、MCF-7、K562和SMMC-7721肿瘤细胞),通过MTT法观察条斑紫菜多糖PY-D2对4种人肿瘤细胞生长的影响,采用流式细胞仪检测肿瘤细胞的细胞周期变化。结果表明,不同浓度的条斑紫菜多糖PY-D2组分诱导肿瘤细胞72小时后,HO-8910、MCF-7、K562和SMMC-7721四种肿瘤细胞的存活率都有所下降。而且,PY-D2浓度越高,肿瘤细胞的存活率越低。在相同诱导浓度下,PY-D2对人乳腺癌细胞MCF-7有较强的抑制作用,500mg·L-1 PY-D2的抑制率为23.6%(p<0.001),1000mg·L-1 PY-D2的抑制率达到32.5%(p<0.001);1000 mg·L-1 PY-D2诱导人卵巢癌细胞HO-8910的抑制率为23.9%(p<0.001);500 mg·L-1 PY-D2诱导人肝癌细胞SMMC-7721的抑制率为21%(p<0.001);相同浓度PY-D2诱导人白血病细胞K562的抑制率为19.8%(p<0.001)。条斑紫菜多糖PY-D2处理人肝癌细胞SMMC-7721后,诱使G0/G1期细胞增多,G2/M期细胞减少,S期细胞无明显变化。条斑紫菜多糖PY-D2处理人卵巢癌细胞HO-8910后,诱使G0/G1期细胞增多,G2/M期细胞无明显变化,S期细胞减少。条斑紫菜多糖PY-D2处理人乳腺癌细胞MCF-7后,诱使G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞增多,S期细胞无明显变化。条斑紫菜多糖PY-D2处理人白血病细胞K562后,诱使G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞增多,S期细胞无明显变化。条斑紫菜多糖PY-D2组分体外对人卵巢癌细胞HO-8910、人乳腺癌细胞MCF-7、人肝癌细胞SMMC-7721和人白血病细胞K562的生长均有明显的抑制作用。而且,PY-D2的抑制作用呈剂量依赖效应。本实验所用的条斑紫菜多糖是经过DE-52层析柱分离纯化的多糖组分,因此显著抑制肿瘤细胞生长的作用很可能是由于多种单糖聚合在一起的协同作用。海藻多糖可能通过间接或(和)直接作用抑制肿瘤细胞生长,本实验中条斑紫菜多糖PY-D2对肿瘤细胞G0/G1期以及G2/M的阻滞作用为其抗肿瘤以及协同化疗药物抗肿瘤的研究提供了实验依据,其有关的分子生物学作用机理值得进一步研究。
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