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目的：T淋巴细胞自血病(T-ALL)是是来源于T淋巴细胞的恶性克隆性肿瘤,发病率约占儿童ALL的10[％]-15[％],占成人ALL的25[％].T-ALL的发病机制常涉及造血前体细胞的遗传基因的改变,导致细胞周期调节紊乱,成熟分化受阻,自我复制增殖过度,凋亡受抑等有关.在近年的临床治疗中,T-ALL患者的缓解率和长期生存得到了显著改善,但仍有30％的病人存在复发和预后不良现象.因此,深入研究T-ALL的发病机制,探索新的治疗靶位仍有重要意义.PTEN是第一个发现的具有双特异性磷酸酶活性的肿瘤抑制基因, 其主要功能是作为脂质磷酸酶使三磷酸-磷脂酰肌醇(PIP3)脱磷酸化,转化为二磷酸-磷脂酰肌醇(PIP2).PTEN则通过降低PIP3的量而成为PI3K/AKT信号通路最重要的负调控因子,逆转PI3K的作用,从而引起其下游的一系列信号分子的变化,使细胞周期停滞于G1期,抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞凋亡.目前研究表明,无论是在实体瘤还是在造血系统恶性肿瘤中,均存在PTEN功能的缺失.T-ALL中PTEN的作用近来也引起重视,但具体机制尚不清楚.Notch信号通路影响造血细胞增殖与分化、凋亡多个过程中,其中Notch1在T细胞的发育过程起重要作用,对T细胞发育的各个阶段进行精细调节.T-ALL中Notch1的突变和异常活化是近来研究的热点,是T-ALL中可能发展的靶向治疗靶点.PTEN和Notch1均与T-ALL的发生发展密切相关,但具体作用机制及其在疾病中的相互作用有待于进一步阐明.在T-ALL中存在Notch1的突变缺失,最终导致Notch信号转导通路的过度激活,促进T细胞发育,阻碍B细胞的发育, 从而导致T淋巴细胞瘤的形成.Notch信号转导通路的激活主要从以下两方面导致肿瘤形成：1、诱导原癌基因C-myc的过表达；2、持续激活P13K/AKT等抗凋亡信号通路.但对于频繁的GSI(Notch信号通路抑制剂)耐药问题的研究发现,PTEN基因缺失可能是主要原因,因此NOTCH1与PTEN在肿瘤发生发展中是否存在相互的调控机制有待进一步研究.而c-myc是NOTCH信号通路下游一重要分子,又作为原癌基因在许多肿瘤中都存在过表达,降低或阻断其过表达能够抑制肿瘤细胞的生长并促进其凋亡,但其触发T-ALL发生发展的机制尚未明确,但是可能作为连接PTEN/AKT与NOTCH1的桥梁而对白血病提供靶向治疗.本研究旨在于通过构建PTEN基因高表达载体,研究PTEN基因对T-ALL细胞系JURKAT增殖凋亡的影响,初步阐明其机制；检测转染PTEN基因前后T-ALL相关基因NOTCH1、C-MYC表达的变化,进一步研究PTEN与C-MYC在白血病发生发展中的相互作用,治愈白血病提供实验依据.方法：将携带有野生型PTEN基因及编码绿色荧光蛋白基因的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)和仅携带有编码绿色荧光蛋白基因的空载体腺病毒(Ad-GFP)分别转染人T淋巴细胞白血病细胞株JURKAT细胞；流式细胞仪检测细胞凋亡情况.MTT法检测细胞生长抑制率.反转录PCR (RT-PCR)检测转染前后PTEN、 MYC、 NOTCH1 mRNA表达水平变化. 结果：1.本实验成功构建了PTEN基因高表达载体,应用携带有野生型PTEN基因及编码绿色荧光蛋白基因的腺病毒(Ad-PTENGFP)转染JURKAT细胞系.2.转染JURKAT细胞48h后,提取RNA, RT-PCR方法检测转染PTEN基因后JURKAT细胞中PTEN呈高效表达,表明转染成功；3.转染野生型PTEN基因的JURKAT细胞表现为增殖明显受抑,与转染空载体组和未转染组比较有统计学意义(P＜0.05),而后两组之间差别无统计学意义(P＞0.05)；4.转染野生型PTEN基因的JURKAT细胞表现为凋亡增多,与转染空载体组和未转染组比较有统计学意义(P＜0.05),而后两组之间差别无统计学意义(P＞0.05)；5.转染野生型PTEN基因的JURKAT细胞显示细胞凋亡率随药物浓度NOTCH1、c-MYCmRNA表达水平则明显低于转染空载体组和未转染组(P＜0.05),且后两者下降有相关性(P＜0.05).结论：1.本实验应用携带有野生型PTEN基因及编码绿色荧光蛋白基因的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)转染JURKAT细胞系,明显抑制人T淋巴白血病细胞系JURKAT细胞增殖,促进细胞凋亡,表明通过抑制PI3K/AKT信号通路,可抑制T-ALL细胞生长、诱导细胞凋亡.2.PTEN基因高表达使NOTCH1表达下调,使C-MYC mRNA水平下调,两者的下调具有相关性.表明PTEN/PI3K/AKT信号通路可以对NOTCH1信号通路具有调控作用,并和C-MYC基因的调控有关.