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群体感应(quorum sensing,QS)是细菌通过分泌和感应特定信号分子的浓度来判断环境中自身或其他细菌的密度,调整基因表达以适应环境的变化的机制。多种动植物病原细菌利用QS系统调控致病因子的表达,如Ti质粒的转移、胞外多糖的产生、植物细胞壁降解酶的产生等,因此,QS系统可以作为细菌致病性抑制剂筛选的新靶点。目前研究较多的QS淬灭剂包括QS信号降解酶和QS抑制化合物。本研究针对以N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl homoserine lactones,AHLs)作为信号分子的QS系统,以4grobacterium tumefaciens NT1 QS系统TraI/TraR为基础,以β-内酰胺酶为报告基因,构建了以土壤杆菌转录调控因子TraR与AHL复合物结合区域"tra-box"连接无启动子β-内酰胺酶基因的报告质粒,将报告质粒转入低β-内酰胺酶表达的突变菌株A.tumefaciensN5构成QS信号报告菌株。AHLs信号分子可诱导报告菌株A.tumefaciensN5(pBA7P)β-内酰胺酶的表达,在以头孢硝噻酚作为底物时,β-内酰胺酶催化头孢硝噻酚内酰胺键断裂使反应体系由黄色变为红色,指示AHL存在。灵敏度检测结果显示:报告菌株对多种AHL分子敏感,其中对N-3-羰基辛酰高丝氨酸内酯[N-(3-oxooctanoyl)-DL-homoserine lactone]信号分子的检测灵敏度达10pmol/L。与传统报告系统相比,该报告系统具有操作简便,反应快速,颜色差异明显,容易观察,筛选效率高,适合高通量筛选等优点。同时适合QS抑制剂化合物和信号降解酶基因文库的通量筛选,目前利用此报告系统已筛选到3个QS信号降解酶和16个QS系统抑制化合物。