细粒棘球绦虫抗增殖蛋白的原核表达及定位分析

来源 :中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:onionshen
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  目的 抗增殖蛋白是一种分布广泛且高度保守的分子伴侣蛋白,具有抗细胞增殖、衰老和凋亡的作用,参与调节细胞周期并维持线粒体的结构和功能.本研究旨在探讨解细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)抗增殖蛋白的特性及在虫体中的分布.方法 根据NCBI公布的抗增殖蛋白基因序列设计特异性引物,从细粒棘球蚴的总RNA中扩增出抗增殖蛋白基因并进行原核表达,应用荧光免疫组化方法观察钙调蛋白在细粒棘球绦虫体内的分布.结果 细粒棘球绦虫抗增殖蛋白基因ORF框有870bp,共编码289个氨基酸,天然抗增殖蛋白的分子质量为32.1KDa,氨基酸序列与多房棘球绦虫的序列相似性高达99%.构建原核表达载体后,在大肠杆菌中获得重组抗增殖蛋白,分子质量大约36KDa,该蛋白能够与人工感染细粒棘球蚴的小鼠阳性血清发生反应,具有一定的免疫原性.荧光免疫组化显示抗增殖蛋白主要位于于原头蚴的表皮层和原头蚴内部以及成虫的虫体内部,并在生发层中广泛分布.结论 基于本研究的实验结果,抗增殖蛋白作为治疗包虫病的新的药物作用靶点将有很大的研究潜力.
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