【摘 要】
：
构建流感病毒多表位的的核酸疫苗,并研究表位基因在BHK细胞内表达产物的生物学活性。筛选流感病毒主要抗原(HA NA NP M)优势抗原表位基因,以生物信息学软件优化其排列结构合
【机 构】
：
大北农集团生物制品事业部动物医学研究中心,北京,100085
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
论文部分内容阅读
构建流感病毒多表位的的核酸疫苗,并研究表位基因在BHK细胞内表达产物的生物学活性。筛选流感病毒主要抗原(HA NA NP M)优势抗原表位基因,以生物信息学软件优化其排列结构合成流感通用多表位基因(Epi),然后定向克隆至真核表达载体pVAX1的CMV启动子下游,构建多表位核酸疫苗pVAX1-Epi.最后将该重组质粒转染BHK细胞,提取细胞全RNA,以RT-PCR方法目的基因；以间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白免疫印迹分析(Westblotting)检测其表达产物抗原性。RT-PCR检测到目的基因；IFA检测到特异性荧光存在；Westblotting检测到目的蛋白条带.本试验所构建的重组质粒pVAX1-Epi,在真核细胞内均获了有效地转录和表达；而且其表达产物均能与相应的抗体特异性结合,证明了其具有一定的生物学活性和抗原性,有望能针对H3、H9亚型流感病毒提供保护。
其他文献
我们都知道用实物教学,效果是良好的。因此,教物理化学等课程,就必须有充足的仪器和教具及时地进行演示。我人民政府成立以来,大力发展教育,建立了很多的学校,如果想在很短
近5年来,本文作者用六味地黄丸联合黄连素治疗老年糖尿病75例,取得了较满意的效果,现报告对象和方法。
在地处云贵高原的贵州大山中,自古以来是少数民族聚居之地,他们在这封闭的大山中繁衍生息,用地道的纯天然药用植物抗衰老和治疗各种疾病的医药方法世代相传.本文作者从医30多
本研究对三江保护区的野生迁徙水鸟携带禽流感病毒和新城疫病毒的状况进行了监测。在2005年10月、2006年4月、2006年10月三个候鸟的迁徙季节从三江保护区采集了158只野鸟咽拭
本研究采用CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute)推荐的K-B(Kirby-Bauer)法,对2006-2007年从四川、重庆、湖北等19个省95个规模化猪场分离的480株大肠杆菌对19
经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/PFV/Restock/34(H7N1)1.7kbHA基因的cDNA,将其克隆到 pMD18-T中并测序。在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后,亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHis
根据GenBank公布的禽流感病毒(AIV))序列设计引物,用PCR方法扩增获得了H9N2亚型禽流感病毒的非结构基因-NS1基因,将该片段定向插入到原核表达载体pET-32a(+)中,获得了重组表
参考H5和H9亚型禽流感病毒(AIV)的HA基因序列设计了两对引物,分别针对AIV H5和H9亚型。这些引物所扩增的cDNA片段大小分别427bp和830bp.利用这2对引物,通过对联和RT-PCR扩增
根据已发表的AIVNA基因序列,设计合成了一对引物,对禽流感病毒A/Chicken/yunnan/B56/06(H9N2)株的神经氨酸酶(NA)基因序列进行测定和分析。经PCR扩增得到了全长为1407bp的NA
将虎源H5N1高致病性禽流感病毒(HPAIV)加入无菌小牛血清中,以此作为病毒灭活试验模型,加入不同浓度的辛酸钠,在不同的酸碱度、温度下孵育,分别于孵育后2h、4h、6h、8h、10h、