禽流感转基因植物可饲用疫苗的研究

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【目的】利用豆科牧草作为植物生物反应器来生产禽流感抗原蛋白,研究提高抗原蛋白表达量的方法。【方法】构建含高效表达元件MAR序列的植物高效表达载体和含引导肽KDEL的融合表达载体,以百脉根的子叶作为外植体,通过农杆菌介导法,将禽流感血凝素基因导入到了豆科牧草推广品种百脉根"里奥"中,经过抗性筛选,获得了抗性植株,对抗性植株进行RT-PCR、SouthernBlot、Western Blot等检测分析。【结果】检测结果表明禽流感血凝素基因已成功在百脉根中表达。而通过荧光共聚焦显微镜观察MHA-GFP的表达结果发现KDEL并未和预想的一样起到将目的蛋白定位到内质网的作用,而是定位到了细胞膜和细胞间隙。【结论】利用豆科牧草作为植物生物反应器来生产禽流感抗原蛋白是切实可行的。同时发现禽流感血凝素基因(HA)本身可能存在着引导蛋白到细胞膜和细胞间隙的序列。HA有很强的定位作用目前还没有报道,尚属首次发现。禽流感血凝素基因在细胞膜及细胞间隙的表达,将为抗原蛋白的纯化提供了可能。
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