【摘 要】
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目的：经典的间接免疫荧光实验(ⅡFA)多采用传统染料硫氰酸荧光素(FTTC)标记,该荧光由于存在发光时间短,易猝灭,无法对被标记物进行长期示踪而有其自身的局限性。量子点(Qu
【机 构】
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南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所,南京210002
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目的：经典的间接免疫荧光实验(ⅡFA)多采用传统染料硫氰酸荧光素(FTTC)标记,该荧光由于存在发光时间短,易猝灭,无法对被标记物进行长期示踪而有其自身的局限性。量子点(Quantum dots,QD)因具有良好的光电性能、尺寸效应(通过调整其粒径大小即可得到不同颜色的发射荧光)和抗光漂白等特点,在一定程度上解决了上述存在的问题。因此,本文目的旨在以CdSe/ZnS荧光量子点为标记,采用ⅡFA对抗核抗体(ANA)进行检测和细胞成像研究,并对其实施效果进行评价。方法：以HEp-2细胞和不同冰冻组织切片为实验基质,用CdSe/ZnS量子点(QD655)耦联羊抗人IgG的F(ab)2片段作为标记抗体,采用ⅡFA对ANA进行检测,并对其实验反应条件进行优化(包括量子点标记抗体工作浓度的确定,紫外光激发稳定试验等),记录不同ANA阳性血清产生的免疫荧光模式和结果滴度,单特异性ANA抗体谱同时用免疫印迹法确认,所测结果与基于FITC标记检测结果进行比对和分析。
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