松材线虫病(Bursaphelenchusxylophilus)又称松树萎蔫病,是一种世界性重大森林病害。其防治工作一直是世界难题。该病自1982年从国外传入我国南京后,至2016年已先后在我国大陆地区的18省发生,致死松树数千万株。我国现有松林面积6亿亩,其中马尾松、黑松、云南松、黄山松、华山松、油松等14种主要造林树种均为感病松种。大面积松林和许多重要风景区的松林景观正面临着松材线虫病的严重威胁。病害防控重点在于防止松树染病,因此疫情的及时发现和疫源的传播阻断就成为了病害防控的关键。目前生产上急需简便、有效、易推广应用的病原监测检疫技术以及媒介昆虫防控实用技术。本项目围绕上述难题,开展相关的创新研究：(1)创新研发了松材线虫专项自动化分子检测系统。在原有实时定量PCR检测技术基础上,对检测过程、结果判读、检测报告等环节进行编程、自动化控制。通过优化筛选获得了高效线虫裂解液,实现了对松木样本直接检测松材线虫的新功能。将检测设备、自动化程序和优化的检测体系进行系统整合,研发出了针对松材线虫的专项自动化检测系统。该系统实现了松材线虫分子检测过程的自动化、检测结果判读自动化、检验结论输出自动化。通过检测全国不同地点样本1000多份,所有含松材线虫的样本均显示阳性,检测结果准确率达100％。对松木直接检测精度为每克松木含有1条松材线虫。(2)松材线虫恒温扩增试纸条判读检测技术。应用交叉引物恒温扩增技术(CPA),根据松材线虫特异片段,研究设计了可在恒温条件下完成松材线虫DNA扩增的特异引物3对及其相应的试剂组合,并创新将其与以免疫学为基础的试纸条检测方法相结合,构建了松材线虫恒温扩增试纸条检测技术。该技术也可直接对松木样品进行检测,检测时间2小时。具有灵敏度高、特异性强、易于判读、检测设备简单、一次性投资低廉、易于普及的优点,通过生产上的300多个疫点推广检测,准确率达100％。该技术与松材线虫专项自动化分子检测系统可满足不同基层用户的需求。(3)创新研发了媒介昆虫特异光源引诱技术,开辟了病害防控新途径。通过昆虫电生理测试筛选出松树蛀干天牛成虫敏感的光波波长A和波长B,林间引诱试验与生产实际应用显示,光波A对松墨天牛成虫具有明显引诱作用,其引诱松墨天牛的数量高于一般市场购买的引诱剂引诱数量。光波B引诱天牛种类多达22属31种,不仅能诱捕到产卵期松墨天牛,还能诱捕到有传病性的补充营养期松墨天牛,同时还能够诱捕到椎天牛(Spondylis buprestoides)、褐梗天牛(Arhopalus rusticus)、小灰长角天牛(Acanthocinus griseus)等松材线虫病的次要传播媒介天牛。弥补了以往生产上其他引诱技术主要针对产卵期松墨天牛和忽略其他次要传播媒介天牛的不足,为病害防控开辟了新途径。松材线虫专项自动化分子检测系统已经在17省推广应用,建立了省级和市级松材线虫分子检测鉴定中心52个,形成全国松材线虫病三级检测鉴定技术网络,检测可疑松木样本11200多份,及时准确确定了陕西、河南、辽宁三省疫情以及数十个县级疫情发生区,查获多起违章调运疫木事件。松材线虫恒温扩增及试纸条判读检测技术在6省应用。媒介昆虫特异光源诱虫灯在3省应用,成功诱捕多种媒介昆虫。受国家林业局委托,举办28期全国防控新技术推广应用培训班,1823名学员已成为我国松材线虫病防控主要技术骨干。