目的:为了研究TLR5受体激动剂及相关信号通路在电离辐射损伤中的保护作用,原核表达并纯化TLR5受体的激动剂CBLB502蛋白,并利用小鼠实验验证表达蛋白的辐射防护作用,为进一步的研究奠定基础。方法:首先采用PCR技术获得CBLB502蛋白对应的全长核苷酸序列,利用载体克隆方法将CBLB502全长序列插入pET28b原核表达载体,经测序后获得pET28b-CBLB502原核表达载体。利用终浓度为0.5mM的IPTG作为诱导剂进行诱导表达,采用SDS-PAGE蛋白电泳鉴定表达情况。利用Ni-NTA亲和层析柱亲和层析纯化CBLB502蛋白。针对CBLB502能够激活NF-κB的特性,经NF-κB特异性报告基因检测方法结合动物实验评价纯化蛋白活性。结果:成功获得CBLB502蛋白对应的核苷酸全长序列,并构建了原核表达CLB502蛋白的pET28b-CBLB502原核表达载体。经IPTC诱导表达实现CBLB502的可溶性表达,经纯化后,获得纯度在95%以上的CBLB502蛋白。小鼠经9 gyγ射线全身照射后,照前给予PBS对照组小鼠于照射后第9天开始死亡,照射后15 d全部死亡,平均存活时间(11.2±2.25)d,而照射前30min给予CBLB502预防组10只小鼠全部存活30 d以上,经t检验分析,两组小鼠存活时间有显著性差异,t=26.41,P<0.001。结论:成功表达并纯化CBLB502蛋白,并验证其对小鼠的辐射防护作用。