目的:研究乙型肝炎病毒(HBV)基因耐药状况、耐药位点及基因型分布特征。方法:收集我院2009年1月～2010年10月间164例乙型肝炎病毒耐药患者血清样本,采用荧光PCR法检测HBV基因分型,由上海之江生物科技有限公司提供试剂,使用美国ABI7500荧光PCR仪检测:采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDL-TOF-MS)技术检测HBV耐药基因突变,使用MALDL-TOF-MS仪(Sequenom,美国)。按iPLEX反应的操作说明进行.PCR扩增、SAF反应、引物延伸、脱盐、点样,MALDL-TOF-MS采集、分析iPLEX反应物的数据,判读基因变异位点。分析164例乙型肝炎病毒耐药患者对拉米夫定(LAM)、阿德福韦酯(ADV)及恩替卡韦(ETV)耐药突变位点和乙型肝炎病毒基因分型。结果:164例乙型肝炎病毒耐药患者中,134例对拉米夫定耐药,主要突变位点为rtM204I;22例对阿德福韦酯耐药,主要突变位点为rtN236T;3例对恩替卡韦耐药,主要突变位点为rtT1846。在B基因型和C基因型中,出现耐药最多见的均是拉米夫定,其次为阿德福韦酯。结论:临床上乙型肝炎病毒对拉米夫定耐药最多见;乙肝病毒基因突变的发生类型与乙肝基因型无显著相关性。