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胞外多聚物是细胞分泌到胞外的一些大分子有机物,这些大分子物质的一些功能基团可通过与重金属离子络合或螯合等方式吸附重金属离子,起到吸附水环境中重金属的作用.随着工业污染的加剧,水环境中的纳米颗粒也成为新的污染成分.水体中的纳米颗粒与单胞藻之间有着怎样的相互作用,单胞藻的胞外多聚物在吸附纳米颗粒以及在纳米颗粒进入藻细胞的过程中发挥着怎样的作用,这些问题尚不十分清楚.电镜观察、是解决上述疑问的一种有效技术手段.建立一种能够保存单胞藻胞外多聚物结构的电镜制样方法,是观察研究藻细胞胞外多聚物与纳米颗粒相互作用的必要前提.
作者在前期的研究中发现,原本50 nm左右的Cu0颗粒、能够以5 nm左右的微小晶粒进入铜绿微囊藻。同样,50 nm左右的Cu0颗粒、可以转变成2nm左右的Cu0微晶进入小球藻细胞。提示单胞藻的胞外多聚物在上述Cu0结构变化过程中可能起重要作用。在小球藻胞外多聚物电镜成像的基础上,通过对比观察,发现Cu0纳米颗粒在小球藻的胞外多聚物这一空间带中随存在部位不同、其形态结构也不相同:在被胞外多聚物吸附的初始阶段、Cu0没有发生结构改变,而附着在细胞壁上的Cu0则转变成了由一些2 nm的微晶颗粒组成的多晶纳米CuO。Cu0的这一结构变化过程,表明小球藻细胞的胞外多聚物可以改变其吸附的纳米Cu0的结构、从而使Cu0更易于进入小球藻细胞。这一观察结果有助于研究者进一步了解Cu0纳米颗粒对单胞藻的毒性作用机制。
钌红染色法是一种保存细胞胞外多糖的透射电镜制样方法。但这种制样方法步骤繁琐,制样周期长,所需试剂价格昂贵。相比钌红染色法,本实验建立的制样方法,操作简单、不需要特殊的试剂及特殊的制样设备,能够满足相关研究对藻细胞胞外多聚物的电镜观察要求。是一种能够有效显示单胞藻胞外多聚物的快速电镜制样方法。