【摘 要】
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以犬细小病毒基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增了全长VP1基因,PCR产物经纯化和NotⅠ/BamHⅠ双酶切后与同样处理的真核表达载体pIRES进行连接,转化到感受态细胞JM109中,筛选了
【机 构】
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成都军区联勤部军事医学研究所,云南,昆明,650032
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会
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以犬细小病毒基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增了全长VP1基因,PCR产物经纯化和NotⅠ/BamHⅠ双酶切后与同样处理的真核表达载体pIRES进行连接,转化到感受态细胞JM109中,筛选了真核重组表达质粒pIRESVP1,并进行了序列测定.6只9月龄犬分别接种不同剂量的pIRESVP1或空质粒及生理盐水,8w接种一次,每次接种前采血,测定血清的血凝抑制效价,第二次免疫后即可检测到较高的血清效价.在第三次接种4w后,对全部实验犬进行攻毒,攻毒后第7d及14d时采血,测定血清的血凝抑制效价.所有接种pIRESVP1疫苗的犬均能抵抗CPV强毒的攻击,而接种空质粒和生理盐水的对照犬则全部发病.本研究证明了所构建的核酸疫苗(pIRESVP1)能使犬免受犬细小病毒强毒的感染。
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