【摘 要】
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目的：肝细胞异常凋亡是目前许多肝脏疾病的主要病理特征之一,而内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)是其重要诱因.5-羟甲基糠醛是从酒制山茱萸中分离出的一种主要活性成分,是治疗急性肝损伤的一种新型的候选化合物.本研究拟从ERS途径探讨5-羟甲基糠醛对肿瘤坏死因子α (TNF-α)和D-氨基半乳糖(D-GalN)所致肝细胞凋亡的保护作用及相关机制.方法和结果：体
【出 处】
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首届国际抑郁共病暨第十届全国中西医结合基础理论学术研讨会
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目的：肝细胞异常凋亡是目前许多肝脏疾病的主要病理特征之一,而内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)是其重要诱因.5-羟甲基糠醛是从酒制山茱萸中分离出的一种主要活性成分,是治疗急性肝损伤的一种新型的候选化合物.本研究拟从ERS途径探讨5-羟甲基糠醛对肿瘤坏死因子α (TNF-α)和D-氨基半乳糖(D-GalN)所致肝细胞凋亡的保护作用及相关机制.方法和结果：体外培养人正常肝L02细胞,用TNF-α(100μg/L)和D-GalN (44 mg/L)诱导肝细胞损伤模型.CCK-8增殖检测发现,与模型组相比,5-羟甲基糠醛有显著减轻L02肝细胞活力降低的效果；同时,流式细胞仪结合形态学观察的结果表明,5-羟甲基糠醛可剂量依赖性地降低细胞的凋亡率.基于钙离子荧光探针Fluo 3-AM高内涵细胞成像分析和Western-blot方法,显示5-羟甲基糠醛可有效抑制细胞质内游离钙离子含量的增高,并使磷酸化PERK、磷酸化elF2α、ATF4、CHOP的蛋白表达量呈逐渐下降的趋势.另外,对BCL-2家族蛋白的平衡调控,以及对细胞凋亡的关键蛋白酶Caspase家族的活性抑制,进一步验证了5-羟甲基糠醛的抗凋亡作用.结论：山茱萸羟甲基糠醛对TNF-α和D-GalN所诱导的肝细胞凋亡具有抑制作用,其机制可能与维持内质网腔钙稳态平衡和下调ERS凋亡相关信号分子PERK、磷酸化elF2α、ATF4、CHOP以及BCL-2、Caspase家族成员的表达调控有关.因此,5-羟甲基糠醛有望成为凋亡相关肝脏疾病治疗的候选药物之一.
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