【摘 要】
：
根据牛副流感病毒3型(BPIV3)内蒙古分离株(NM09株)的全基因组序列(GenBank No.JQ063064)设计7对引物,以BPIV3NM09株提取的RNA为模板,通过RT-PCR分段扩增出病毒全长基因组,各个基因片段克隆到PCRBlunt载体并测序,利用生物信息学软件DNAstar中的SeqMan对各片段进行拼接,获得BPIV3NM09全基因序列.利用DNAstar软件中的Seq Bui
【机 构】
：
中国农业科学院特产研究所,特种经济动物分子生物学国家重点实验室,吉林长春 华威特(北京)生物科技有
【出 处】
：
第166场中国工程科技论坛——人兽共患病防控
论文部分内容阅读
根据牛副流感病毒3型(BPIV3)内蒙古分离株(NM09株)的全基因组序列(GenBank No.JQ063064)设计7对引物,以BPIV3NM09株提取的RNA为模板,通过RT-PCR分段扩增出病毒全长基因组,各个基因片段克隆到PCRBlunt载体并测序,利用生物信息学软件DNAstar中的SeqMan对各片段进行拼接,获得BPIV3NM09全基因序列.利用DNAstar软件中的Seq Builder和在线分析软件NEBcutter,对BPIV3NM09株全基因组序列进行酶切位点分析,找到合适的酶切位点进行连接,并分别在基因组N端和C端分别引入锤头状核酶结构(HamRz)和丁肝病毒核酶结构(HdvRz).同时根据pCR-Blunt载体和pcDNA3.1(+)载体上的多克隆位点次序,将各个BPIV3NM09株基因片段按照一定的先后顺序依次亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建获得BPIV3NM09株全长cDNA克隆pcDNA3.1-NM09.利用脂质体转染法将纯化的全长质粒pcDNA3.1-NM09及辅助质粒pcDNA3.1-NP、pcDNA3.1-P和pcDNA3.1-L共转染BSR细胞,在MDBK细胞上盲传,经RT-PCR、FA或IFA鉴定,成功获得重组BPIV3病毒.本研究为进一步开发基因工程重组疫苗和研究该病毒毒力因子以及分子致病机理奠定了基础.
其他文献
经颅直流电刺激作为一种非侵入性的脑调控技术受到了临床研究的广泛关注.本研究为了探索经颅直流电刺激对大脑运动区的作用,采用功能近红外光谱成像技术采集被试在经颅直流电刺激前后做动手指任务时左侧运动区的近红外数据,比较了被试接受经颅直流电刺激前后左侧运动区激活情况.结果表明,阳极刺激后,左侧运动区的激活程度增强了;阴极刺激后,左侧运动区的激活程度减弱了.功能近红外光谱成像技术能够准确有效地评价经颅直流电
本文的目的是采用一种基于MEA(Micro-electrode Array)器件的神经网络电兴奋性定量测试的新方法——电压阈值测定法,分析酒精作用下神经网络电兴奋性改变.其原理是:在MEA表面培养形成的神经网络未产生自发动作电位时,以脉冲电压作为刺激信号,测定出在不同浓度酒精作用下恰好能够激发神经网络产生标准神经动作电位的条件电压阈值,将其作为衡量酒精对神经网络电兴奋性影响的定量指标.首先采用电压
目的 - 研究光学成像和治疗方法在监测、治疗和预防皮肤癌变中的潜在临床价值。方法 - 使用紫外灯或日光模拟器多周持续照射无毛小鼠,建立人皮肤癌前病变和皮肤鳞状细胞癌的动物模型。照光建模过程中使用光学相干成像(optical coherence tomography,OCT)技术,定期在体无损观察小鼠皮肤癌变的动态过程,建立与活检和光学显微镜检查获得的组织病理学变化的对应关系。并使用不同剂量的体表光
本文以股骨颈骨折为研究对象，指出股骨颈骨折内固定的疗效与众多因素有关，但最主要的有：①损伤的程度，包括暴力的大小、骨折移位和粉碎程度以及血供破坏与否；②骨折复位是否满意，骨折固定是否足够稳定；③骨折修复愈合的能力，从目前的研究结果看，在患者全身和局部条件允许时尽早对股骨颈骨折做手术内固定有助于提高疗效，尤其是对年轻人群。
本文通过文献检索，评价了椎体成形术在减轻疼痛、提高生活质量方面的疗效以及对术后新发骨折风险的影响，同时根据临床试验选用的对照组的不同（假手术或保守治疗）进行了亚组分析，研究表明，对比不同对照组，经皮椎体成形术对疼痛缓解的作用有显著不同。与保守治疗相比，经皮椎体成形术能显著缓解疼痛。在生活质量评估上，经皮椎体成形术RDQ评分（随访30天）及QUALEFFO评分较对照组提高。经皮椎体成形术不会增加新发
本文以老年无移位股骨颈骨折为研究对象，对于该病的诊断。必须仔细进行临床检查，尤其是轻轻地内外旋转下肢时，患者感觉疼痛加剧或患侧不能单肢负重，即应进行CT或MRI检查，对嵌插骨折、隐匿骨折等无移位骨折做到早期诊断、早期治疗，主要治疗方法包括：保守治疗、闭合复位内固定术、半髋或全髋置换术等。选择治疗方法时应考虑以下因素：(1)年龄，(2)基础病：参照美国麻醉协会ASA评定标准，(3)伤前活动能力，(4
本文就股骨颈骨折内固定种类的发展、常用内固定的优缺点、适应证等做一概述,指出应当根据骨折的类型、位置、方向以及患者骨质疏松情况，骨折粉碎程度，复位的质量，和患者的年龄、病理特点等，选择合适的内固定治疗方法，控制并发症。
本文以老年股骨颈骨折为研究对象，阐述了复位内固定和是人工关节置换的优缺点、适应证等，指出合理的手术时机应当是在全面评估患者病情并做出相应处理，使患者在符合手术条件与要求的身体条件下尽早手术。过度追求早期手术而忽视必要的术前评估和处理，有可能增加术中和术后的并发症风险。
从20世纪80年代末开始于中国大陆的宠物饲养,经历了不同的阶段,政府也出台了各种政策和管理措施.狂犬病的控制在人与动物共患疾病中始终占有第一的地位,农业部、各省市兽医主管部门、执业兽医师和犬猫饲养者均予以了高度的重视,进口和国产的狂犬病疫苗使用区域逐年扩大,使得城市中饲养的犬和猫患狂犬病的数量极少.同时,一些可以经过犬或猫传染给人但是没有狂犬病影响大的疾病,依然不少!对于疾病的研究、监控、预防和治
人工全髋关节置换手术的固定方式分两大类：骨水泥固定和生物学固定。骨水泥型全髋关节置换通过在假体与骨床间填充骨水泥，形成假体—骨水泥—骨结构；生物型全髋是假体与骨床直接接触，植入人体后，依靠骨组织反应生长能力，使骨与假体表面形成紧密的生物固定。骨水泥型全髋关节置换术的优点包括：(1)假体可以获得即刻的固定；(2)用骨水泥做介导，可分散假体—骨床间的应力分布，避免应力集中；(3)扩大假体应力传导范围；