电穿孔对人红细胞物理和生物活性的影响

来源 :第九届全国冷冻干燥学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tanjuan1980
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电穿孔是一种可以将非渗透性的外源分子载入细胞内部且不伤害细胞的物理方法,它在转基因、遗传、细胞融合等方面有着广泛的应用。我们采用此方法将海藻糖载入红细胞内部。取得了较好的载糖效果,使细胞内的海藻糖浓度达到63.68mM,而经过电脉冲后的红细胞的渗透脆性在50%溶血时的NaCl浓度为3.32g/L-4.01g/L,较正常略有降低,而最大溶血率(细胞外海藻糖浓度800mM、电压300v,脉宽1ms、频率4次/min时)为29.6%,同等海藻糖浓度未加电穿孔时的溶血率为15%,所以有电穿孔引起的溶血仅为14%左右;而电穿孔后,细胞内酶的活性差别较大:SOD酶呈明显的下降趋势,G6PD的活性变化不是明显,而ATPcase却是呈现出增加的趋势,此外我们通过对酶活性的测定还证明了细胞内的海藻糖对细胞内酶活性具有保护作用。
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