【摘 要】
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目的 探讨苯对C57 BL/6小鼠造血干细胞分化能力影响,及其代谢产物1,4-苯醌对多能造血干细胞LSK(Lin-sca1+ c-kit+)更新与分化信号通路的关键基因表达的影响.方法 36只雄性8周龄C57BL/6小鼠,随机分成3组,以食用油为溶剂,苯染毒浓度分别为0,150和300 mg·kg-1 ·d-1,皮下注射染毒,每周5d,连续染毒4周.染毒期间,观察小鼠一般情况,隔天称重,记录小鼠体
【机 构】
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东南大学环境医学工程教育部重点实验室,江苏南京210006
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目的 探讨苯对C57 BL/6小鼠造血干细胞分化能力影响,及其代谢产物1,4-苯醌对多能造血干细胞LSK(Lin-sca1+ c-kit+)更新与分化信号通路的关键基因表达的影响.方法 36只雄性8周龄C57BL/6小鼠,随机分成3组,以食用油为溶剂,苯染毒浓度分别为0,150和300 mg·kg-1 ·d-1,皮下注射染毒,每周5d,连续染毒4周.染毒期间,观察小鼠一般情况,隔天称重,记录小鼠体质量.实验结束,检测各组小鼠体重、血常规指标、脏器系数,分离骨髓细胞并应用流式细胞术分析多能造血干细胞LSK(Linsca1+ c-kit+)比例,比较各组多能造血干细胞(LSK)的比值.以AriⅢ流式细胞仪分选正常小鼠的LSK细胞,以0.5 μmol·L-1 1,4-苯醌对多能造血干细胞LSK进行染毒,48 h后收获细胞,提取RNA,逆转录获得cDNA,以real-timePCR方法测定造血干细胞信号通路Wnt,Notch与Hh中关键基因β联蛋白,Notch,Bmil的mRNA表达量.结果 实验前后,各组间体重变化无显著性差异.染毒组胸腺系数与对照组相比明显降低.血常规结果显示,染毒组红细胞、白细胞、中性粒细胞与对照组相比明显降低(P＜0.05),高剂量组与低剂量组在红细胞、白细胞、血红蛋白中存在统计学差异(P＜0.05).流式细胞仪分析结果显示,每10万个骨髓细胞,对照组、低剂量组和高剂量组多能造血干细胞(LSK)均值为52.64,28.59,17.95,染毒组与比照组明显降低,两实验组间无显著性差异.以1,4-苯醌0.5 μmol·L-1染毒多能造血干细胞(LSK)48 h,结果显示,β联蛋白,Notch1,Bmi1基因在染毒组相对对照组的表达水平分别是0.17,0.35和0.34,与对照组相比,表达量显著降低.结论 苯具有造血系统毒性,抑制骨髓造血干细胞的更新,其机制可能与苯的代谢产物抑制Wnt,Notch与Hh信号通路相关.
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