转hpa5Xm烟草的获得及其对TMV抗病性分析

来源 :中国热带作物学会第九次全国会员代表大会暨2015年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cyg858644
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  从棉花角斑病菌(Xanthomonas citri subsp.malvacearum)中克隆并鉴定出的hpaXm 是一类新的harpin 蛋白,本研究首次将来自棉花角斑病菌的hpaXm 基因采用农杆菌介导法导入模式生物三生烟(Nicotiana tobacum cv.Xanthinc),获得转基因烟草,通过分子鉴定和蛋白活性测定,研究hpaXm 的内源表达对转基因烟草的影响,结果表明:PCR 扩增检测到T1 代烟草阳性植株的靶基因序列及35S 启动子序列,Southern blot 检测结果证明hpaXm基因已经整合到受体基因组中,RT-PCR 结果显示在hpaXm 基因在转录水平上正常表达.从转hpaXm 基因烟草中分别提取可溶性蛋白能激发烟草产生过敏反应,说明目的基因在转基因烟草中能表达出有活性的蛋白.HpaXm 的内源表达虽不能使转基因烟草产生大面积可见的坏死斑,但经台酚蓝染色后能观察到有微过敏反应的现象,同时hpaXm 能诱导其对烟草花叶病毒(TMV)产生抗性.本研究对于探索hpaXm 在转基因作物中所诱导的生物学特性提供科学依据.
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