【摘 要】
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神经坏死病毒(Nervous necrosis virus,NNV)属于诺达病毒科的一种病毒,它能引起鱼类病毒性神经坏死病,从而引发斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)苗种大量死亡。由于不含病毒
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神经坏死病毒(Nervous necrosis virus,NNV)属于诺达病毒科的一种病毒,它能引起鱼类病毒性神经坏死病,从而引发斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)苗种大量死亡。由于不含病毒的基因组,病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)被认为是一种最有潜力的能够预防病毒病的疫苗。本研究以一种斜带石斑鱼神经坏死病毒序列为分子基础,通过基因工程手段研制出一种在原核系统中表达的病毒样颗粒。这些病毒颗粒的结构和大小与天然病毒相同。在疫苗免疫过程中,含有CpG寡核苷酸基序的佐剂被添加到疫苗中。VLP组和疫苗加佐剂(VA)组鱼中的6种免疫相关基因的表达模式被用来评估疫苗对先天性免疫和适应性免疫的调节影响。荧光定量实验表明6种基因在鱼的九种健康组织中都能普遍表达;单独使用疫苗就能够刺激MHCIa、MyD88、TLR3、TLR9和TLR22基因的表达,表明疫苗具有一定的免疫功效;在免疫72小时后的肝脏、脾脏和肾脏中,VA组的所有基因表达量都明显高于VLP组,表明VA组中的鱼获得更持久的免疫保护力来抵御病原侵害。本研究不仅证明了CpG寡核苷酸基序作为佐剂能够提高疫苗的保护功效,而且能为以后石斑鱼病毒疫苗开发提供一些理论基础。
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