肠道菌群分泌多种糖苷酶可裂解肠粘蛋白的ABH血型抗原,为血型改造提供了丰富的酶来源。α-乙酰半乳糖胺酶与α-半乳糖苷酶分别移除红细胞表面A、B抗原末端相应单糖是制备通用型血的有效方法[1],但已知的血型改造糖苷酶活性低且单一,那如何在肠道菌群蛋白中筛选出可同时裂解A、B抗原的多效糖苷酶?活性蛋白表达谱(ABPP)技术利用活性分子探针可在复杂的生物体系中选择性标记活性目标蛋白[2]。已知α-半乳糖构型的六元环多醇氮丙啶化合物可以同时标记α-乙酰半乳糖胺酶与α-半乳糖苷酶[3],据此我们合成了血型改造糖苷酶的生物素型探针JJB468,将探针对小鼠肠道群蛋白进行筛选,质谱分析鉴定所标记的糖苷酶,最后通过表达纯化与酶活验证(图1),筛选出可同时移除α-乙酰半乳糖胺与α-半乳糖的糖苷酶即为双效血型改造糖苷酶。该酶将为血型改造提供新的酶工具,对应急输血或临床输血研究具有重要意义。本课题拓宽了ABPP技术应用领域,为菌群宏蛋白质组学研究提供了新思路。