前列腺癌中miR-361-5p通过Sp1途径抑制细胞增殖

来源 :江苏省第九次男科学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kekexil123
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  目的:确定前列腺癌中miR-361-5p能够直接靶向作用于Sp1抑制Sp1的表达和抑制前列腺癌的增殖。方法:前列腺癌细胞株DU145与PC3体外脂质体转染miR-361-Sp mimics与阴性对照无意义核苷酸序列(NC),采用CCK-8实验检测转染后的细胞增殖能力;低密度细胞集落形成实验检测细胞形成克隆的能力;qRT-PCR检测转染后Sp1的表达;DU145与PC3细胞体外转染Sp1 siRNA后与NC组相比CCK-8实验检测转染后的细胞增殖能力;低密度细胞集落形成实验检测细胞形成克隆的能力;构建包含miR-361-5p种子序列结合位点Sp1的3-UTR序列的野生型和突变型psiCHECK-2双萤光素酶报告基因质粒,分别与miR-361-5p mimics与NC共转染后萤光素酶报告基因实验检测荧光活度;Western Blotting检测转染miR-361-5p mimics与NC后前列腺癌细胞中Sp1的表达。
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