目的：新近发现,在含有T细胞受体(TCR)γ δ抗体和转化生长因子-3 (TGF-3)的体外诱导培养体系中,外周血单个核细胞可诱导生成新型的调节性γ δ T细胞(γ δ Treg).该群细胞具有免疫抑制功能,Foxp3表达阳性且CD25和CD27高表达.我们前期研究发现粒细胞集落刺激因子(G-CSF)可能具有免疫调节作用,G-CSF动员可能影响TRGV和TRDV(γ δ T细胞的TCR)亚家族的谱系分布和克隆性,且G-CSF动员后TRDV1亚家族表达的稳定性与移植受者移植物抗宿主病(GVHD)的低发生率呈正相关.为进一步研究G-CSF的免疫调节功能,本研究探讨了G-CSF体外诱导生成γ δTreg的可能性.方法：在含有TCRγδ抗体和TGF-β或G-CSF或G-CSF+TGF-β联合应用的体外诱导培养体系中培养正常人外周血单个核细胞(同时设置空白组),分别采用流式细胞术(FACS)检测细胞免疫表型、CFSE试剂盒结合FACS检测细胞增殖抑制功能以及实时定量PCR检测Foxp3和CD25的表达水平.结果：体外诱导培养9天后,TGF-β组、G-CSF组和G-CSF+TGF-β组Foxp3+γδ T细胞比例(分别为62.3％、52.9％和63.5％)、CD25+γδ T细胞比例(43.5％、43.4％和44.4％)以及CD27+γ δ T细胞比例(41.5％、41.9％和44.0％)均明显高于空白组的Foxp3+γ δ T细胞、CD25+γδ T细胞和CD27γδ T细胞(7.87％、3.9％和3.5％).TGF-β组、G-CSF组和G-CSF+TGF-β组诱导产生的γδ T细胞对CD4+T细胞增殖的抑制作用均明显强于空白组,但诱导实验组之间的细胞增殖抑制作用无明显差异.TGF-β组、G-CSF组、G-CSF+TGF-β组的Foxp3表达水平(0.623％、0.639％和0.843％)均显著高于空白组(0.384％)( P＜0.001).G-CSF+TGF-β组的Foxp3表达水平明显高于TGF-β组和G-CSF组(P=0.001,P=0.007).TGF-β组、G-CSF组、G-CSF+TGF-β组和空白组的CD25表达水平则无明显差异(P=0.457).结论：初步证实正常人外周血单个核细胞在含有TCR γδ抗体和G-CSF的体外诱导培养体系中可诱导产生γδ Treg.