【摘 要】
：
建立简便的一步法RT-PCR检测方法,对禽流感病毒(AIV)的血凝素(HA)分型进行了研究.参照AIV的HA基因序列设计了1对引物,对H9和H5亚型AIV的扩增产物大小分别为579bp和177bp,很容
【机 构】
：
山东省农业科学院家禽研究所,山东,济南,250023
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会
论文部分内容阅读
建立简便的一步法RT-PCR检测方法,对禽流感病毒(AIV)的血凝素(HA)分型进行了研究.参照AIV的HA基因序列设计了1对引物,对H9和H5亚型AIV的扩增产物大小分别为579bp和177bp,很容易通过凝胶电泳进行辨别.该引物与EDSV、NDV、IBV、IBDV、REV、REOV及SPF鸡肌肉组织的核酸无交叉反应,对Genebank收录的部分毒株HA序列的互补性分析结果进一步核实了检测引物的特异性.敏感性分析发现,从50pg的AIV总RNA中亦能检测到目的条带.这些结果表明,此次利用1对引物建立的一步法RT-PCR简便适用,可以在一个反应管中同时将H9和H5亚型AIV进行快速检测和分型.同时,两个亚型的扩增产物均包含了裂解位点在内的HA基因序列,可通过测序推导出氨基酸顺序以判定H5或H9亚型禽流感病毒的潜在毒力。
其他文献
本研究利用已经构建的高度致弱、具有高度鸡胚适应性以及具有广泛抗原针对性的重组禽流感H5N1亚型种毒Re-1株和H9N2亚型种毒Re-2株为种毒,研制出新型禽流感H5、H9二价灭活疫
为探讨密码子及表达载体优化的H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5对鹅的免疫保护效力,将pCAGGoptiHA5以100μg剂量加强免疫4周龄鹅,同时设油苗免疫对照组和空白对照组,加
对HA基因密码子及表达载体优化的H5亚型禽流感DNA疫苗pCAGGoptiHA5的免疫效果进行了研究.pCAGGoptiHA5分别以100μg和10μg剂量一次或加强免疫3周龄SPF鸡,单次免疫后4周以同
本研究采用低致病力禽流感病毒(LPAIV)H9N2亚型A/Chicken/Shanghai/10/99(SH/10/99)和A/CK/Guangxi/10/99(GX/10/99)毒株作为免疫原,免疫8周龄BALB/C小鼠,用血凝抑制试验(HI)
本实验利用已制备禽流感H5亚型的单抗,通过对ELISA反应各步最佳工作条件的确定,建立了以多抗作为包被抗体,单抗作为一抗的ELISA诊断方法,对各个工作组分的工作条件作了优化,
用纯化的H7亚型禽流感病毒灭活后多次免疫山羊采血分离血清制备包被抗体,以自制的H7亚型特异性单克隆抗体作为一抗,建立了检测H7亚型流感病毒抗原的双抗体夹心ELISA方法.经实
以H7N2亚型禽流感病毒分离株A/Chicken/Hebei/01/03(H7N2)(HB103)作为免疫原,浓缩纯化后免疫BALB/C小鼠,三次免疫后,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,融合阳性细胞用血凝抑
本文首先对猪繁殖与呼吸综合征的症状进行了概述，然后介绍了猪繁殖与呼吸综合征的常规疫苗以及基因工程疫苗，最后介绍了我国猪繁殖与呼吸综合征现状及防制难点。
1株针对禽流感病毒的单克隆抗体标记胶体金颗粒,另一株包被于硝酸纤维素膜上,建立检测禽流感病毒的胶体金免疫层析法检测试纸条(ICS).同时应用ICS和HA试验检测尿囊液,结果当H
基于目前已知禽流感病毒基质蛋白、血凝素、神经氨酸酶基因,研究建立了A型、H5、N1、H9、N2亚型特异性RT-PCR及H5/N1、H9/N2、A/H5/N1多重RT-PCR检测技术,用于检测或同时检测