【摘 要】
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癌症严重威胁着人类的健康和生命,目前已成为全球的头号杀手.大量研究表明,及早诊断和高效治疗是防治癌症与降低死亡率的最有效办法.然而,由于其发病机制尚未完全阐明,一直存在早期诊断难、源头创新药物少和治疗手段缺乏等问题.因此,迫切需要构建特异性好、灵敏度高的分析新方法用于癌症相关标志物的检测,以期为癌症的早期发现、预警和治疗提供新的手段.本工作以抑癌基因p53为研究对象,首次结合靶催化发夹组装和酶辅助
【机 构】
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中国科学院兰州化学物理研究所,中科院西北特色植物资源化学重点实验室,兰州 730000 南昌大学,
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癌症严重威胁着人类的健康和生命,目前已成为全球的头号杀手.大量研究表明,及早诊断和高效治疗是防治癌症与降低死亡率的最有效办法.然而,由于其发病机制尚未完全阐明,一直存在早期诊断难、源头创新药物少和治疗手段缺乏等问题.因此,迫切需要构建特异性好、灵敏度高的分析新方法用于癌症相关标志物的检测,以期为癌症的早期发现、预警和治疗提供新的手段.本工作以抑癌基因p53为研究对象,首次结合靶催化发夹组装和酶辅助的链置换放大技术构建了非标记、超灵敏的化学发光DNA酶传感器,具体原理如Fig.1.采用凝胶电泳、化学发光光谱验证了该原理的可行性,并对反应时间、探针浓度、化学发光条件等进行了优化.在最优条件下,测得靶标p53的线性范围为2.0×10-15～1.0×10-9mol/L,检测限为8.5×10-16 mol/L.该方法成功应用于碱基错配DNA及实际样品的分析.另外,整个检测过程都在均相溶液中进行,对DNA无任何修饰,操作简单,成本低,通过改变发夹DNA的碱基序列,可将本方法用于其它核酸的检测.
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