论文部分内容阅读
目的:探讨右美托咪啶及乌司他丁对梗黄大鼠肝损伤的保护机制。方法:40只雄陛SD大鼠,体重为230~270g,随机分5组,每组8只,为假手术组(Sham组:大鼠行假手术操作,不做胆总管结扎(bile duct ligation,BDL))、生理盐水组(NS组:)、右美托咪啶治疗组(DEX组:大鼠BDI后DEX治疗)、乌司他丁治疗组(UTI组:大鼠BDI后UTI治疗)和右美托咪啶复合乌司他丁治疗组(DEX+UTI组:大鼠BDI后DEX-+UTI治疗)。检测如下:1)全自动生化分析仪检测血清肝功能(ALT、ASI、TBIL和TP)。2)ELISA法检测血清TNF-α、IL-6,观察血清炎性因子水平变化。3)石蜡切片HE染色和免疫组化,观察肝脏形态学改变及炎细胞浸润。4)冰冻标本检测qPCR和Western(TNF-α、IL-6、TLR4和NF-κB)。结果:1.肝脏HE染色观察结果:Sham组肝脏未见明显变化,NS组肝组织出现严重病理学损伤改变,DEX组、UTI组及联合组肝组织损害明显改善,仅见部分肝脏组织胆管增生和空泡变性。2.大鼠肝功能结果:与Sham组相比,NS组TBIL,ALT和AST水平显著增高,TP水平显著降低;与NS组相比,DEX组、UTI组和DEX+UTI组TBIL,ALT和ASI水平显著降低,TP水平显著增高;联合组效果优于单独用药组;UTI组TBIL治疗效果优于DEX组;两单独用药组ALT、AST、TP无明显差异。3.IL-6和TNF-α的ELISA检测结果:与Sham组相比,NS组的IL-6和TNF-α水平显著增高:与NS组相比,三治疗组IL-6和TNF-α水平显著降低;联合组效果优于单独用药组;两组单独用药组组间无明显差异。4.肝脏免疫组化结果:Sham组肝组织中,TLR4和NF-κB几乎没有或有很少表达,NS组中二者的表达水平明显高于Sham组,三组药物治疗组中,两药单用或联用都能引起这两个分子的表达下调。5.肝脏炎症因子qPCR检测结果:qPCR结果显示,mRNA水平上,NS组IL-6、TNF-α、TLR4和NF-κB四个炎症相关指标的表达水平显著高于Sham组。三组药物治疗后,各指标有不同程度恢复,DEX+UTI组更明显,单独用药组间无明显差异。6.肝脏炎症因子Western blot蛋白检测结果:与Sham组相比,几-6、TNF-α、TLR4和NF-κB在NS组显著增高;与NS组相比,三治疗组各指标水平显著降低;联合组IL-6和TNF-α显著低于单独用药组;TLR4和NF-κB在单独用药组和联合用药组无明显差异。结论:1.DEX和UTI单用及联用对梗阻性黄疸大鼠肝损伤具有显著保护作用,可以降低肝损伤过程中促炎因子产生和释放。2.DEX及UTI可能是通过抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路实现对梗阻性黄疸大鼠肝损伤的保护。3.DEX和UTI联用对肝功能的保护和抗炎作用可能优于药物单用,而DEX和UTI单独应用的效应无显著差别。