维生素A对NOp诱导奶牛乳腺上皮细胞氧化损伤的保护作用

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本试验旨在研究维生素A(VA)对外源性一氧化氮供体二乙烯三胺/一氧化氮聚合物(NOp)诱导奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)的氧化损伤是否有保护和预防性保护作用。试验采用单因子完全随机试验设计,将第三代BMEC随机分为4个处理组,每个处理组6个重复。4个处理组分别是对照组(-VA-NOp),无VA无NOp培养30 h;NOp处理组(-VA+NOp),无VA培养24 h后,NOp培养6 h;VA处理组(+VA-NOp),VA培养30 h;VA保护组(+VA+NOp),VA培养24 h后,加入NOp继续培养6 h。根据课题组前期预试验结果确定NOp的处理剂量和时间分别为1 000μmol/L、6 h;VA的添加浓度为1μg/mL。试验结果表明,NOp处理组的细胞增殖率显著低于对照组(P<0.05);VA处理组的细胞增殖率显著高于对照组(P<0.05);VA保护组的细胞增殖率低于VA处理组,差异不显著,但是显著高于NOp处理组(P<0.05)。与NOp处理组相比较,VA保护组的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和硫氧还蛋白还原酶(TRxR)的酶活性显著升高(P<0.05);硒蛋白P(SelP)的含量有升高趋势,但是差异不显著(P>0.05);相反,诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的酶活性、细胞因子白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)、一氧化氮(NO)、活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的浓度都显著降低(P<0.05)。基因表达量的结果表明,与NOp处理组相比较,VA保护组谷胱甘肽过氧化物酶1(GPx1)和硫氧还蛋白还原酶1(TRxR1)的基因表达量显著升高(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)和SelP的基因表达量也升高,但是差异不显著;而iNOS、白介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的基因表达量均显著降低(P<0.05)。从细胞增殖率、抗氧化指标、细胞因子浓度和基因表达量的结果可以得出,浓度为1 000μmol/L的NOp,作用BMEC 6 h后,引起了BMEC的氧化损伤,VA对NOp诱导引起的BMEC氧化损伤有潜在的保护和预防性保护作用。
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