【摘 要】
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目的：探讨扶正抗癌方增敏吉非替尼抑制肺癌作用的分子机制.方法：MTS法检测肺癌细胞经药物处理后的细胞活性;流式细胞术(碘化丙啶PI染色)检测肺癌细胞经药物处理后的细胞周期变化;蛋白质印迹法检测p-Akt、Akt、p65、p50和MUC1蛋白的表达水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测MUC1在mRNA水平的表达;瞬时转染过表达Akt、p65和MUC1在肺癌细胞中的表达水平;裸鼠成瘤实验及生
【机 构】
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广东省中医院肿瘤科,广州,510006
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目的：探讨扶正抗癌方增敏吉非替尼抑制肺癌作用的分子机制.
方法：MTS法检测肺癌细胞经药物处理后的细胞活性;流式细胞术(碘化丙啶PI染色)检测肺癌细胞经药物处理后的细胞周期变化;蛋白质印迹法检测p-Akt、Akt、p65、p50和MUC1蛋白的表达水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测MUC1在mRNA水平的表达;瞬时转染过表达Akt、p65和MUC1在肺癌细胞中的表达水平;裸鼠成瘤实验及生物发光成像进行扶正抗癌方联合吉非替尼对肺癌作用的体内实验.
结果：扶正抗癌方抑制肺癌细胞(A549和H1650)增殖,联合吉非替尼后抑制作用增强;扶正抗癌方导致细胞周期阻滞在G0/G1期;扶正抗癌方抑制Akt的激活,即降低其活性形式p-Akt的表达,联合吉非替尼后其抑制作用增加;扶正抗癌方抑制p65的表达,联合吉非替尼后其抑制作用更甚;扶正抗癌方抑制MUC1在蛋白及mRNA水平的表达,联合吉非替尼后其抑制作用明显增强;扶正抗癌方抑制p65表达的作用可被过表达Akt逆转、而抑制MUC1的作用又可被过表达P65逆转,同时过表达MUC1对p65的表达无影响,但可提高p-Akt的表达水平;过表达MUC1可逆转扶正抗癌方对肺癌细胞活性的抑制作用;进一步的体内实验结果显示,相较于单用扶正抗癌方或单用吉非替尼,扶正抗癌方和吉非替尼两者联合具有显著增强的抑瘤作用,同时p-Akt、p65、和MUC1蛋白的表达水平进一步受抑制.
结论：扶正抗癌方通过调控MUC1明显增敏吉非替尼对肺癌的抑制作用.
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