融合启动子调控下鸡IL-2基因 cDNA输卵管组织特异性表达

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:david6357
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将含有鸡卵清溶菌酶5端激素受体结合位点的DNA片段和卵清蛋白基因5端调控序列进行融合并与鸡IL-2基因cDNA以串联方式置于真核表达载体pcDNA3的CMV启动子下游,构建了鸡输卵管定位表达载体pcDNA3-LGP-OVP-IL2.将真核表达载体pcDNA3-IL2和输卵管定位表达载体pcDNA3-OVP-IL2、pcDNA3-LGP-IL2及pcDNA3-LGP-OVP-IL2转染鸡输卵管上皮细胞,激素诱导64h后,以淋巴细胞转化试验来检测细胞培养液中IL-2的表达水平及生物学活性。 结果显示,转染细胞均可表达IL-2,所表达的IL-2有促进T淋巴细胞转化和促进淋巴母细胞成熟的活性。转染pcDNA3-LGP-OVP-IL2和pcDNA3-OVP-IL2的输卵管上皮细胞表达产物在1:256稀释水平下仍具有促进T淋巴细胞转化和促进淋巴母细胞成熟的活性;在相同激素水平下,融合启动子的调控能力没有明显的提高;转染pcDNA3-LGP-IL2和pcDNA3-IL-2输卵管上皮细胞虽有IL-2的表达,但水平较低.
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