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建立了高速逆流色谱法分离纯化杭白菊中4种黄酮类化合物.320 mg杭白菊粗提物中以乙酸乙酯-乙醇-乙酸-水(4∶1∶0.2∶5,v/v/v/v)作为两相溶剂系统,上相作为固定相,下相作为流动相,得到了10 mg芹菜素-7-0-β-葡萄糖、28mg木犀草素-7-0-β-葡萄糖、150 mg芹菜素-7-0-β-葡萄糖三种黄酮类物质,以氯仿-甲醇-水(4∶3∶2,v/v/v)为两相溶剂系统得到了12 mg金合欢素-7-0-β-葡萄糖.经过高效液相色谱分析,其纯度分别为99.4％、93.6％、99.1％、99.5％.其化学结构由1H-NMR和13C-NMR鉴定.该方法简便快速的对杭白菊中黄酮类化合物进行了分离纯化,具有较好的使用价值,为杭白菊的进一步开发应用提供了参考依据.