鹅细小病毒和番鸭细小病毒双重PCR检测方法的建立

来源 :第五届南京农业大学畜牧兽医学术年会----家禽高效养殖与重大疫病防控研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pangzhu311
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根据GenBank上登录的鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)基因序列,分别设计合成针对GPV非结构蛋白(Ns)和MDPvNS2-VP1基因片段的2对引物GPV U/L和MDPV U/L,将GPV和MDPV提取核酸混合后作为模板,优化PCR反应条件,建立了能同时检测这2种病毒的双重PCR。特异性试验结果显示,引物GPV U/L仅特异性扩增出GPV—GZ1和GPv-GZ2株730 bp核酸片段,引物MDPVu/L仅特异性扩增出MDPV的624 bp核酸片段,双重PCR扩增出长度分别为730bp和624 bp的2条特异性片段,而扩增鸭瘟病毒(DPV)和鹅副黏病毒(GPMV)的核酸扩增结果均为阴性。敏感性试验结果显示,双重PcR能同时检测到14.4 pg的GPV核酸和28.8 pg的MDPV核酸。结果表明,建立的双重PCR可用于GP、,和MDPV的鉴别诊断和联合检测。
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