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目的:观察电针任督脉经穴联合人脐血MSCs移植对脑缺血再灌注大鼠缺血半暗带病理形态及细胞凋亡的影响,探讨电针联合MSCs移植治疗脑缺血疾病的可能作用机制.
方法:采用密度梯度分离法体外培养、扩增人脐血MSCs,用流式细胞术鉴定其免疫学表型并描绘其生长曲线.将SD大鼠随机分为:假手术组、PBS移植组、MSCs移植组和MSCs移植+电针组,各组又分为术后7d、14d及28d 3个时间段.采用线栓法建立局灶性右侧脑缺血再灌注(MCAO)模型。除假手术组外,其他组于术后24h行右侧纹状体注射PBS或人脐血MSCs进行干预。采用HE染色观测缺血半暗带组织病理改变并采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)原位检测其细胞凋亡情况。
结果:成功分离、纯化并鉴定人脐血MSCs。HE染色结果显示,MSCs移植、MSCs联合任督脉电针都可减轻脑组织病理损害,后者效果优于前者。TUNEL结果显示,与单纯MSCs干预比较,两者联合干预能更好减少缺血半暗带神经细胞凋亡(P<0.05)。
结论:与单纯MSCs移植比较,电针任督脉联合MSCs移植能更好减轻缺血性病理损害程度和减少神经细胞凋亡,两者联合具有协同效应。