【摘 要】
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目的 研究和建立了一种基于96孔板-酶标仪的精子顶体酶活性检测方法.方法 根据郎伯-比尔定律ABS=E×L×C,采用Kenndy方法,研究和确定不同梯度浓度精子顶体酶与分光光度法(1cm比色皿)/酶标仪法(250uL)测定值的关系及方程；比较和确定常规分光光度法与酶标仪法测定值之间的关系及方程；最后根据常规分光光度法酶活性计算方程,顶体酶活性(μIU/106精子)=测定管OD值一空白管OD值)×1
【机 构】
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广州医科大学附属第三医院生殖医学中心,广州
【出 处】
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广东省医学会第四次生殖医学学术会议
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目的 研究和建立了一种基于96孔板-酶标仪的精子顶体酶活性检测方法.方法 根据郎伯-比尔定律ABS=E×L×C,采用Kenndy方法,研究和确定不同梯度浓度精子顶体酶与分光光度法(1cm比色皿)/酶标仪法(250uL)测定值的关系及方程；比较和确定常规分光光度法与酶标仪法测定值之间的关系及方程；最后根据常规分光光度法酶活性计算方程,顶体酶活性(μIU/106精子)=测定管OD值一空白管OD值)×106/(495×每管中加入的百万精子数),确定酶标仪检测精子顶体酶活性的计算方程.结果 不同梯度浓度精子顶体酶与常规分光光度法测定值之间的呈线关系,线性方程为：y(样本浓度)=1.512×x(吸光度0D405),R2=0.997；酶标仪法测定值与不同梯度精子顶体酶之间的呈线性关系,线性方程为：y(样本浓度)=1.257×x(吸光度0D405),R2=0.999；常规分光光度法与酶标仪法测定值之间呈线性关系,方程为：y(酶标仪测定值=1.203 x(分光光度法测定值),R2=0.9999；进一步推导出酶标仪检测法计算方程：顶体酶活性(μIU/106精子)=(测定管OD值-空白管OD值)×106/(411.5×每管中加入的百万精子数).结论 酶标仪检测法与分光光度法都可用于精子顶体酶活性的测定,两者测定结果一致；利用酶标仪检测精子顶体酶活性其检测效率远远高于常规的分光光度法.
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