【摘 要】
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目的 探讨化学致痫剂马桑内酯对体外培养的小胶质细胞细胞周期分布及TNFα和IL-1β释放的影响.方法 利用改良的方法得到纯化培养的小胶质细胞,给予马桑内酯(5×10-5mol/L
【机 构】
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华中科技大学同济医学院解剖学系,武汉430030
【出 处】
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中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第七届全国学术会议(The 7th Biennial Meeting and the
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目的 探讨化学致痫剂马桑内酯对体外培养的小胶质细胞细胞周期分布及TNFα和IL-1β释放的影响.方法 利用改良的方法得到纯化培养的小胶质细胞,给予马桑内酯(5×10-5mol/L)刺激1、2、4、8、24 h或不同浓度(10-3 mol/L,10-4mol/L,10-5 mol/L,10-6 mol/L)处理12h,流式细胞仪检测细胞周期的变化,根据不同需要利用免疫细胞化学方法、免疫荧光方法结合Western blot检测细胞CD 11 b/c、NFκB p65、cyclin D1及IL-1β的表达,实时荧光定量RT-PCR检测cyclin Dl mRNA及IL-1β mPA表达的改变.放免法检查培养液上清中TNFα、IL-1β的含量.结果 (1)不同浓度刺激均能促进NFκB p65表达核移位(P＜0.01)并引起培养液上清中IL-1β和TNFα含量较对照组明显增高(P＜0.05).(2)流式细胞仪检测结果不同浓度刺激均引起小胶质细胞G0/G1期细胞比例明显减少(P＜0.05),S期+G2/M细胞比例明显增加(P＜0.05).高浓度(10-3mol/L)刺激可出现S期阻滞,凋亡细胞比例增加.(3)流式细胞仪结果显示马桑内酯(5×10-5mol/L)处理引起小胶质细胞S期及G2/M期细胞比例增加,以2h最为明显；伴有cyclin D1、cyclin D1 mRNA表达上调.(4)马桑内酯处理(5×10-5mol/L)后1h培养液上清中TNFα迅速升高(P＜0.05),两小时达到峰值(P＜ 0.01).
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