酶标雌二醇的制备及三种凝胶层析的结果比较

来源 :全国首届生物毒素学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuanreng
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目的:制备辣根过氧化物酶标雌二醇复合物,并比较不同孔径葡聚糖凝胶对复合物纯化的效果。酶标雌二醇既保留一部分酶活性又可与雌二醇抗体结合,而且这种免疫活性可被自由的雌二醇竞争。方法:研究人员在国内首次用雌二醇一17一半琥泊酸与氯甲酸异丁酯在三正丁胺存在下生成活化酯衍生物,然后与辣根过氧化物酶的游离氨基缩合,制备出复合物,再分别经Sephadex G-50,G-75,G-200分离纯化,得到使用效果满意的酶标雌二醇复合物,结果:用三种凝胶均可将游离的雌二醇除去,G-200纯化所得酶标物在同样的工作浓度(5mg/L)下,较G-75及G-50纯化的酶标物计数高。结论:该实验室在国内首次制备出了E2-17-Hemi-HRP,经酶联鉴定使用效果令人满意,该文就不同孔径大小的凝胶对纯化的影响做了详细的论述。
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