【摘 要】
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背景：紧密连接是肠上皮细胞间的主要连接方式,在维持肠上皮细胞正常通透性中发挥重要作用.促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)属应激反应因子,能够引起肠上皮细胞通透性的改变,前
【出 处】
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第二十七届全国中西医结合消化系统疾病学术会议
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背景：紧密连接是肠上皮细胞间的主要连接方式,在维持肠上皮细胞正常通透性中发挥重要作用.促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)属应激反应因子,能够引起肠上皮细胞通透性的改变,前期研究发现细胞角蛋白8 (CK8)参与肠易激综合征(IBS)肠上皮细胞通透性的改变,有研究提示角蛋白为应激相关蛋白,CRF可以引起P38 MAPK信号通路的活化并参与调控NF-κB,而NF-κB的活化与CK8过表达相关,CRF是通过何种途径引起CK8表达升高从而作用于紧密连接相关蛋白引起肠上皮细胞通透性改变需要进一步研究.
目的：探讨CRF通过P38 MAPK/NF-κB途径上调CK8，从而介导紧密连接蛋白改变。
方法：利用HT-29细胞株建立肠上皮屏障模型，采用免疫荧光及RT-PCR检测CRFRl及CRFR2受体，分为对照组和CRF处理组，CRF处理组以lOOnMCRF分别处理细胞72h后，免疫荧光检测两组CK8、肌动蛋白(F-actin)及紧密连接相关蛋白(zo-1、Claudin-1、Occiudin)的表达，以lOOnMCRF分别处理细胞24h、48h和72h，蛋白质印迹法检测相应蛋白表达量的变化及磷酸化P38 MAPK、NF-κB P65的表达。
结果：HT-29细胞表面存在CRFR1及CRFR2受体，CRF处理后HT-29细胞CK8的荧光强度增高，F-actin外周轮廓模糊，zo-l和Claudin-1荧光减弱、Occiudin胞内颗粒样浓聚。
结论：CRF可能通过P38 MAPK/NF-xB途径上调CK8表达，从而介导F-actin重排及紧密连接蛋白改变。
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