【摘 要】
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目的 :建立一种特异、灵敏、简便的交叉引物恒温扩增技术快速检测沙门氏菌。方法 :根据Genbank上公布的沙门氏菌invA基因序列,选择保守区域设计恒温扩增引物和探针,并对反应体系和反应条件进行优化,同时验证方法的特异性和灵敏度。结果 :本方法对invA基因检测具有高度特异性;对invA阳性质粒DNA和菌液检测灵敏度分别达到了1.8×101 copy/μL和6.2×10~3 cfu/mL;对20份
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目的 :建立一种特异、灵敏、简便的交叉引物恒温扩增技术快速检测沙门氏菌。方法 :根据Genbank上公布的沙门氏菌invA基因序列,选择保守区域设计恒温扩增引物和探针,并对反应体系和反应条件进行优化,同时验证方法的特异性和灵敏度。结果 :本方法对invA基因检测具有高度特异性;对invA阳性质粒DNA和菌液检测灵敏度分别达到了1.8×101 copy/μL和6.2×10~3 cfu/mL;对20份临床标本的检测阳性率与荧光PCR法相同,大大高于传统培养法;同时恒温扩增实验过程操作简便、反应迅速,且无需使用昂贵仪器,最快可在1 h内出检测结果。结论 :本研究建立的沙门氏菌核酸恒温扩增快速检测技术具有快速、灵敏和特异等优势,适用于沙门氏菌腹泻病人的床边诊断以及食物中毒的现场快速检测。
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