【摘 要】
：
目的：构建人白细胞介素24(IL-24)基因的表达载体并在大肠杆菌中诱导表达。观察纯化后的IL-24融合蛋白导致人胰腺癌细胞(Panc-1)生长抑制的作用。方法：用限制性内切酶从质粒pET30b-IL24中酶切获取人IL-24cDNA片段。并将该片段与pET42a原核表达载体基因重组，在大肠杆菌中实现重组基因的表达，提取并纯化rhIL-24蛋白。用SDS-PAGE和Westernblot对表达产物
【机 构】
：
首都医科大学附属北京朝阳医院消化内科 100021 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家
【出 处】
：
中华医学会北京分会2007年度消化系病学术年会
论文部分内容阅读
目的：构建人白细胞介素24(IL-24)基因的表达载体并在大肠杆菌中诱导表达。观察纯化后的IL-24融合蛋白导致人胰腺癌细胞(Panc-1)生长抑制的作用。方法：用限制性内切酶从质粒pET30b-IL24中酶切获取人IL-24cDNA片段。并将该片段与pET42a原核表达载体基因重组，在大肠杆菌中实现重组基因的表达，提取并纯化rhIL-24蛋白。用SDS-PAGE和Westernblot对表达产物进行鉴定。以不同浓度的重组蛋白IL-24与胰腺癌细胞Panc-1、正常肝胚细胞CCC-HEL-1共培养48小时，同时设立相应浓度梯度的HIS-GST融合蛋白组对照组。采用MTT法检测各组细胞的生长抑制情况。结果：酶切结果证实，成功构建了pET42a-IL24原核表达载体，并在大肠杆菌中获得稳定的表达。rhIL-24蛋白以浓度依赖性的关系抑制Panc-1细胞的生长，抑制率明显高于HIS-GST蛋白。结论：rhIL-24蛋白对胰腺癌细胞Panc-1生长抑制有作用。
其他文献
本文对CRRT治疗剂量进行了探讨。连续性肾脏替代治疗(CRRT)是由血液透析技术不断衍生而来的一种新的抢救危急重症患者的重要方法，在危重病医学领域,其应用已远远超出单纯肾功能不全的治疗故又称之为连续性血液净化治疗(CBP)。1984年Gotloib等证实CRRT可通过滤出炎性因子而发挥作用,Ronco也提出了炎性因子的峰浓度理论,认为CRRT通过同时降低炎性和抗炎性介质浓度,使其在低浓度下达到新的
危重医学工作的相当部分是呼吸治疗,而机械通气是呼吸治疗的主要工作,临床常见各种呼吸疾病病人行机械通气时存在人机协调问题。机械通气效果受两方面影响：呼吸机和病人,撇开呼吸机的性能和呼吸机使用者的能力之外,呼吸模式的选择和常用参数的设置往往会影响到人机协调。本文围绕下列问题进行了探讨：通气过程的触发,形式和灵敏度设置；气流传输系统的灵敏度,气流形态,呼气阀设计,PEEP的影响,额外气流的影响等。病人的
目的：调查我国三级医院ICU呼吸治疗的仪器装备、工作内容和完成人等,为规范和发展呼吸治疗提供依据。方法：在2006年8月的三次大规模会议上发放问卷,调查30个省264家三级医院320个ICU的491名医护人员。结果：有创与无创呼吸机数,床位数分别为0.52/1和0.16/1;超声、喷射式以及定量雾化器的配用率分别为55.9％(179,320)、33.7％(108/320)和12.2％(39/320
机械通气己经成为危重病人重要的支持治疗手段之一。本文阐述了临床实施机械通气需要结合患者目前疾病状况、机械通气的应用目的及机械通气可能导致的副作用，综合判断在机械通气时患者需要达到的血气指标，不宜简单的以正常的血气指标作为机械通气的最终目标。
目的：探讨高迁移率族蛋白B1在重症急性胰腺炎肠屏障损害中的作用及其机制。方法：采用逆行胆胰管注射50g/L牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型。Wistar大鼠56只,随机分为正常对照组(Control组,n=8),SAP组(n=40),二硫代氨基甲酸吡咯烷处理组(PDTC组,n=8)。SAP组分别于建模后3、6、12、24、48h取材,PDTC组于建模后24 h取材。测定血浆内毒素(LPS)、二胺氧化酶
目的：探讨压力释放-双相正压通气(APRV/BIPAP)模式下,不同压力组合肺复张/开放(RMs)策略疗效,摸索最佳压力组合,观察对血流动力学等影响。方法：大肠杆菌腹腔注射制作猪急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型,APRV-BIPAP下,逐步递增压力组合(Phigh/Plow),即RM1(30/15)、RM2(35/20)、RM2(40/25)、RM4(45/30)、RM
本文对血浆(1-3)-β-D-葡聚糖对深部真菌感染诊断进行了临床研究。文章比较了这种新的深部真菌感染检测方法与传统实验室的培养方法之间的关系，评价了如何可以更准确的诊断深部真菌感染。
本文对HIV-1特异性CD8 T细胞增强表达PD-1引起细胞免疫损伤和疾病进展进行了研究。文章指出，慢性HIV-1典型进展病人CD8 T细胞高表达PD-1导致病毒特异性CTL免疫功能显著地降低，进而促进了疾病进展;而阻断PD-1信号途径可恢复损伤的CD8 T细胞功能，为慢性HIV感染的治疗提供了一种新型的治疗策略。
本文通过应用CHO细胞表达的重组人IFN-β-1a,治疗136例慢性丙型肝炎患者,着重观察了治疗前后血清ALT水平、HCV RNA基因型、HCV RNA载量、肝组织的病理变化以及其中21例患者的肝星状细胞的变化情况,了解IFN-β-1a和RBV对慢性丙型肝炎病患者肝脏炎症和纤维化的改善情况,并探讨HCV RNA基因型、HCV RNA载量、生化学应答、病毒学应答与肝脏病理之间的关系以及肝脏组织纤维化
随着理论和临床的进展,低位直肠癌很多可以通过经腹会阴联合直肠癌根治(Miles)术、直肠低位前切除和全直肠系膜切除术、Parks手术、经骶切除术、各种拖出式切除术和局部切除术予以根治并保留肛门.多组随机对照研究显示,保肛手术疗效与Miles术相当,局部复发率没有明显增加.本文内容包括：一、经内外括约肌切除手术方式二、经内外括约肌间切除术(ISR)的手术技巧三、TME加经内外括约肌间切除术(ISR)