【摘 要】
：
目的 探讨NNK 暴露对16HBE 细胞凋亡的影响,并探索环状RNA 在NNK 所致细胞凋亡中的调控作用.材料和方法体外培养16HBE,使用不同浓度NNK(0μM,50μM,100μM,200μM,300μM)染毒48h.采用流式细胞术分析每组细胞的细胞凋亡率.通过生物信息学预测出细胞凋亡调控相关的circRNA,经qRT-PCR 验证并挑选出NNK 暴露细胞中差异表达改变最明显的circRNA.
【机 构】
：
广州医科大学公共卫生学院化学致癌研究所;呼吸疾病国家重点实验室,广州,511436
【出 处】
：
中国毒理学会表观遗传毒理专业委员会第一次学术大会
论文部分内容阅读
目的 探讨NNK 暴露对16HBE 细胞凋亡的影响,并探索环状RNA 在NNK 所致细胞凋亡中的调控作用.材料和方法体外培养16HBE,使用不同浓度NNK(0μM,50μM,100μM,200μM,300μM)染毒48h.采用流式细胞术分析每组细胞的细胞凋亡率.通过生物信息学预测出细胞凋亡调控相关的circRNA,经qRT-PCR 验证并挑选出NNK 暴露细胞中差异表达改变最明显的circRNA.RNase R 酶处理结合q RT-PCR 检测circRNA 稳定性；构建circ_0001472干扰/过表达体系,qRT-PCR 检测干扰/过表达效率.干扰和过表达circ_0001472 后,联合NNK 染毒,经流式细胞术检测各组细胞凋亡率改变情况.结果 不同浓度NNK 处理16HBE 细胞48h 后,与未处理组相比,16HBE 细胞凋亡率随NNK 浓度增加而剂量依赖性增高,300μM NNK 处理组细胞凋亡率最大.通过生物信息学分析,结合qRT-PCR 验证,发现circ_0001472 在NNK 暴露的16HBE 细胞中表达上调最明显.RNase R 处理结果显示,circ_0001472 表达未受明显影响.干扰/过表达体系可显著改变circ_0001472 的表达水平,而不影响亲本基因表达.敲减circ_0001472 后,流式细胞术分析发现NNK 所致细胞凋亡显著减少,而过表达circ_0001472 则加重了NNK 暴露所引起的16HBE 细胞凋亡.结论 随着NNK 染毒浓度增加,16HBE 细胞凋亡率剂量依赖性增加,circ_0001472 表达上调加重了NNK 所诱导的16HBE 细胞凋亡.
其他文献
目的 由于重金属其存在形态的多变性、累积性和不可降解性，易通过不同暴露途径对人体健康造成危害，本研究主要评价人体重金属内暴露对氧化损伤水平的影响.方法 我们对263 个石家庄社区人群进行研究，基于自愿原则，我们对人群进行问卷调查、健康体检以及血尿样本的收集.我们通过查阅文献挑选出大气污染中常见的五种重金属铅、铬、镉、砷、铜，通过ICP-MS 检测尿中重金属含量，然后使用全自动临床化学分析仪测定尿肌
放射致DNA 损伤应答是细胞在放射损伤下维持细胞稳态的重要调控机制，其在DNA 的复制、细胞的分裂或基因组损伤修复中具有重要意义.mRNA 的N6-甲基腺嘌呤修饰(m6A)被证实在细胞发育和疾病发生等方面具有重要作用，研究m6A 修饰参与的放射损伤应答可以从表观遗传层面对DNA 损伤应答的调控作用以及机制进行新的阐释.目的：为表观遗传层面辐射损伤的研究奠定基础，同时发现重要靶分子为放射损伤的生物学
目的：脂肪含量和肥胖相关基因(Fat mass and obesity associated gene,FTO)作为RNA 去甲基化酶,影响被修饰基因的表达,在肥胖以及肿瘤中起着重要的作用.DNA损伤应答在肿瘤发生发展中同样至关重要,但FTO 是否参与调节DNA 损伤应答及其机制相关研究较少,值得深入探讨.方法：使用不同DNA 损伤修复机制的化合物(DNA 交联剂、DNA 双链断裂剂、烷化剂和嘌呤
目的：揭示目标外泌体lncRNA 在PM2.5 致呼吸系统的DNA 损伤效应中的作用,并初步探讨其分子机制.方法：采用PM2.5 染毒HBE 细胞、将染毒后细胞与正常HBE 细胞共培养以及将染毒后细胞分泌的外泌体和正常HBE 细胞共孵育三种处理方式,通过ELISA 试剂盒、Western blot和碱性彗星实验检测HBE 细胞DNA 损伤情况.并利用高通量测序检测正常细胞和PM2.5染毒细胞外泌体
目的：探究mm9_circ_011539 在PM2.5 暴露小鼠单核巨噬细胞RAW264.7 中的表达改变及其在DNA 损伤应答(DDR)中的功能.方法：使用0、25、50、75、100μg/ml 的PM2.5 悬液暴露RAW264.7 细胞24h 和48 h,用qRT-PCR 检测mm9_circ_011539 的表达水平,Western blot 检测RAW264.7 细胞中Y-H2AX 表达
目的 建立接近环境实际暴露水平的炭黑纳米颗粒致呼吸道上皮细胞DNA 损伤模型,寻找功能circRNA 并探讨其在炭黑纳米颗粒致人呼吸道上皮细胞DNA 损伤中的分子机制.方法 选择16HBE、BEAS-2B 细胞和BALB/c 小鼠作为研究对象,构建炭黑纳米颗粒致DNA 损伤模型,通过CCK-8、LDH 和ROS 实验检测细胞活力及氧化应激水平.通过ELISA、Western Blot、彗星实验检测
目的：探讨多环芳烃(PAHs)与金属的联合暴露、miRNA 基因上的遗传多态性、以及基因-环境交互作用对焦炉工人遗传损伤水平的影响.方法：我们选择了1385 名焦炉工人,检测其尿中多种PAHs 代谢产物和金属的浓度,用来评价个体的暴露水平；采用彗星实验和微核实验,评估个体外周血淋巴细胞遗传损伤程度；对四个常见的miRNA基因上的单核苷酸多态性(SNP)位点(包括rs11614913、rs22928
目的 微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)是富营养化水中产生的一种常见水污染物,具有很强的生殖毒性.以往研究发现MC-LR 能够诱导中国仓鼠卵巢细胞内质网应激和自噬的发生,但其具体作用机制尚不明确.IRE1 通路是内质网应激通路中的一条重要通路.因此,本研究旨在探索IRE1 通路在MC-LR 诱导小鼠卵巢颗粒细胞自噬中的作用.方法 将KK-1 细胞(来源于小鼠卵巢颗粒细胞)
目的 miRNAs作为基因转录后调控因子,参与内质网(ER)驻留蛋白环氧合酶2(COX-2)介导的细胞内环境稳态调节；本研究拟探讨经由ER应激(ERS)介导外源物(如镉化合物)暴露诱导心血管细胞毒性中miRs/COX-2调控机制.方法 分离原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC),采用CdCl2(20,40,80 μM)处理(12,24,36 h)建立细胞暴露模型；检测COX-2(PTGS2基因)、血管
目的 微囊藻毒素-LR(Microcystin-leucine arginine,MC-LR)是一种环状七肽化合物,由水生蓝细菌产生,具有强烈的生殖毒性.本研究探索组蛋白H3 在赖氨酸4(histoneH3 at lysine 4,H3K4me3)上的三甲基化作用以及氧化应激在MC-LR 诱导的SD 大鼠睾丸支持细胞凋亡中的作用.方法 常规提取、培养SD 大鼠支持细胞,分为对照组、低染毒组(MC-