目的应用ALDI-TOF MS技术对阳性血培养标本中的病原菌进行直接快速的鉴定。方法共收集2016年3月至5月阳性血培养164瓶,经过去除细胞杂质和高速离心集菌等前处理方法后,提取蛋白进行MALDITOF MS的直接鉴定,同时对报阳性血培养瓶进行转种培养,纯菌落用质谱鉴定,并将这两种方法的鉴定结果进行比较。结果 164瓶阳性血培养,单一感染为160瓶,用质谱直接鉴定和纯菌落鉴定一致的有126株,正确率为78.8%,其中大肠埃希菌19株,鲍曼不动杆菌13株,阴沟肠杆菌6株,粘质沙雷菌3株,洋葱伯克霍尔德菌2株,金黄色葡萄球菌13株,纹带棒状杆菌4株,毗邻颗粒链球菌1株,产气荚膜杆菌1株,正确率均为100%。肺炎克雷伯菌11株,正确率84.6%,肠球菌15株,正确率78.9%。鉴定不一致及未得到鉴定结果的有34株,以革兰阳性球菌和念珠菌较多。混合感染4瓶,有一瓶直接鉴定得到金黄色葡萄球菌和粪肠球菌,与菌落鉴定一致,正确率25.0%。结论 MALDI-TOF MS可用于阳性血培养的直接检测,对血流感染中主要病原菌的鉴定符合率较高,且操作简便快速,比常规菌落鉴定方法提早24h报告鉴定结果,成本低廉,适合在临床微生物实验室中推广应用。