【摘 要】
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利用PCR方法将W96株的SLT-Ⅱe B亚单位基因与其F18菌毛的优势粘附因子FedF亚单位基因以24nt的寡核苷酸连接,两亚单位均不含信号肽序列.将该合基因克隆到pUC19后测序列表明所有核苷酸序列均正确.亚克隆到pET28b后转入宿主菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测发现约44KD的目的蛋白主要以包涵体形式存在.用Ni亲和柱层析纯化到了相应分子量的蛋白质.
【机 构】
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重庆市永健生物技术有限责任公司 重庆市永健生物技术有限责任公司;西南农业大学蚕学及生物技术学院(重
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利用PCR方法将W96株的SLT-Ⅱe B亚单位基因与其F18菌毛的优势粘附因子FedF亚单位基因以24nt的寡核苷酸连接,两亚单位均不含信号肽序列.将该合基因克隆到pUC19后测序列表明所有核苷酸序列均正确.亚克隆到pET28b后转入宿主菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测发现约44KD的目的蛋白主要以包涵体形式存在.用Ni<2+>亲和柱层析纯化到了相应分子量的蛋白质.
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