猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆5’非翻译区序列缺失突变分析

来源 :2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:marticabi
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对单股正链RNA病毒的研究发现:基因组5’非翻译区(5’UTR)在病毒的复制,转录,翻译过程中发挥了至关重要的作用。对猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)5UTR的研究意义重大。因此本研究在PRRSV感染性克隆pCBC2的基础上,通过突变PCR获得了病毒基因组5’UTR系列缺失的全长突变体克隆:pCBCM1,pCBCM3,pCBCM5,7,9,45,69,100,随后将上述突变体体外转录成RNA之后转染MARC-145细胞,进行病毒感染性、复制和转录分析,以鉴定特定的缺失区的调控功能。结果显示:病毒5’UTR起始的第1个碱基是保持病毒感染性非必需的核苷酸;前45个碱基对病毒基因组的复制是非必需的。Northern Blot结果显示pCBCM1亚基因组mRNA可以进行高效率的转录,而其余突变体的亚基因组转录受到严重抑制。由此证明,PRRSV 5’UTR的完整性对病毒意义重大,碱基的少量以及大部分缺失会对病毒产生极大的影响。
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