类风湿性关节炎患者中γδT细胞CDR3免疫组库特征分析

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目的:通过分析类风湿性关节炎(RA)患者外周血γδT细胞受体互补决定区3(CDR3)的免疫组库特征,为阐明γδT细胞在RA中发挥的作用及相关机制奠定基础。方法:采集RA患者和年龄、性别相匹配的健康对照组外周血,利用梯度离心法分离单个核细胞(PBMC),并利用免疫组库技术,全面系统的对RA患者γδT细胞受体CDR3免疫组库特征进行分析。并用我们前期发现的γδT细胞识别的自身免疫病相关抗原CCT蛋白的血浆浓度对RA患者进行分组,比较组间γδT细胞受体CDR3免疫组库特征的差异。结果:分析RA确诊患者和与其匹配的健康志愿者γδT细胞CDR3区的序列,发现RA患者δ链的多样性显著低于健康对照组,说明RA患者δ链出现选择性扩增。但RA患者γ链的多样性高于健康对照组,说明RA患者的γ链可能倾向于产生更多的克隆。但比较第一位、前五位、前十位的克隆数都无明显差异。分析胚系基因片段取用的频率发现,RA患者γ链取用以TRGV3为主,健康对照组无明显的取用偏好。但由于个体差异比较大,所以CDR3在长度分布、N片段的插入和消减多态性上均无显著差异。依据血浆CCT浓度(包括CCT5、CCT6和CCT8)对RA患者进行分组后,发现CCT-high组与健康组免疫组库存在较大的差异。结论:RA患者外周血γδT细胞的CDR3免疫组库较健康组出现特异性变化,部分变化与γδT细胞识别的患者血浆中的CCT蛋白相关。
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