目的:土贝母，Bolbostemma paniculatum(Maxim.)Franquet(Cucurbitaceae)，是一种传统中药，载于清代赵学敏编著的《本草纲目拾遗》。古代用它的块茎来治疗乳岩、乳痈、乳腺增生和瘰疬等疾患。四川省和陕西省的老中医用它来治疗食道癌和胃癌，效果显著，但因恶心、呕吐等消化道副作用而限制了它的临床应用。我们从1978年开始从生药土贝母中分离、纯化抗癌活性成分，并对其中得率最高(1.9％)、水溶性和稳定性较好的土贝母苷甲(下称苷甲)的药效学、药代动力学、毒理学及其作用机制进行了较系统的研究。微管(microtubule)是存在于所有真核细胞中由微管蛋白(tubulin)组装成的长管状细胞器结构，通过其亚单位的组装和去组装能改变其长度，对低温、高压和秋水仙素敏感，是细胞骨架的主要结构成分之一。在细胞内能与其它蛋白共同组装成纺锤体、基粒、中心粒、鞭毛等结构。微管在细胞形态结构、细胞分裂和运动中起着重要作用。在细胞有丝分裂过程中，当细胞由分裂问期进入分裂期后，细胞质中的微管迅速崩溃，解聚成微管蛋白，微管蛋白重新装配为纺锤体，介导染色体的运动，分裂进入末期后，纺锤体解聚又装配成微管。某些植物类抗癌药如秋水仙素、紫杉醇等就是通过影响微管蛋白的聚合— 解聚活性来破坏微管组装与去组装的动态平衡，遏制肿瘤细胞的有丝分裂从而发挥其抗癌作用。细胞凋亡(apoptosis)又称为程序性细胞死亡(programmed cell death，PCD)，是在生理或某些病理条件下细胞主动参与的“自杀”过程。近年来的研究表明，许多抗癌药物均能诱导肿瘤细胞凋亡，这可能是抗肿瘤药物抵制肿瘤生长的主要途径之一。以前我们已经证明苷甲能将人宫颈癌(HeLa)、人髓性白血病细胞(HL-60)阻滞在G2/M期并诱导其凋亡，诱导人鼻咽癌细胞(CNE-2Z)凋亡。本实验从微管蛋白着手来探讨苷甲诱导肿瘤细胞凋亡的机制，为该药的临床应用奠定理论基础。 方法:从新鲜猪脑中提取微管蛋白，用于微管聚合和解聚实验；Lowrys法测得微管蛋白浓度为1.20～1.37 mg·ml-1；Sehiff改良法检测苷甲对微管蛋白聚合和解聚的影响；改进的Minotti法提取HeLa细胞的微管蛋白；蛋白免疫印迹法检测微管蛋白，Raf-1和bcl-2的表达。 结果:苷甲不但能明显抑制微管蛋白聚合而且还能抑制其解聚，苷甲对微管蛋白的这种作用既不同于秋水仙素也与紫杉醇有别；苷甲作用HeLa细胞后，导致细胞中Raf-1激酶活化和bel-2磷酸化。 结论:苷甲抑制微管蛋白聚合和解聚，进而导致肿瘤细胞中Raf-1激酶激活及bcl-2磷酸化，诱导细胞凋亡。本实验提示Raf-1活化和bcl-2磷酸化是微管破坏的结果。