斑点叉尾鮰IgM抗体亲和力成熟的研究

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抗体亲和力成熟是获得性免疫反应最重要的特征之一,即抗体的亲和力随着免疫反应而逐渐增加的过程。与哺乳动物相比较,抗体亲和力成熟的研究在硬骨鱼中才刚刚起步。本实验以斑点叉尾鮰为研究对象,腹腔注射TNP-KLH(T细胞依赖抗原)和TNP-LPS(T细胞非依赖抗原),采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测免疫后鱼血清IgM抗体的亲和力,通过酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测外周血B细胞分泌的IgM抗体亲和力,和运用流式细胞仪的方法测定B细胞表面IgM抗体的亲和力。通过以上研究得出:(1)TNP-LPS组(免疫后第3周免疫反应达到高峰)达到免疫反应高峰比TNP-KLH组(第4周免疫反应达到高峰)来的更早、更快;(2)在免疫反应早期,两个抗原免疫组都是以低亲和力抗体为主,随着免疫反应的进行,高亲和力的抗体在后期占据优势;(3)比较得出,血清抗体、B细胞分泌的抗体,以及B细胞表面抗体的亲和力成熟成正相关的关系。同时本研究建立了一种有效测定硬骨鱼类B细胞表面抗体亲和力成熟的流式细胞仪方法。抗体亲和力成熟的研究将为渔用疫苗的制备开发以及免疫反应的精确评价提供理论基础。
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