论文部分内容阅读
核因子κB受体活化因子配体(RANKL)是破骨细胞形成的关键分子,近年靶向RANK通路成为治疗骨质疏松(OP)和类风湿关节炎(RA)等骨侵蚀类疾病的一个有效策略.青藤碱在临 床和动物实验均表现出治疗RA的作用,但其对破骨细胞的影响还未见报道.在本研究中,我们通过MicroCT扫描发现青藤碱可以减轻热灭活结核分枝杆菌H37Ra (Mt)诱导的佐剂性关节炎大鼠模型骨质流失,并降低血清中抗酒石酸碱性磷酸酶(TRACP 5b)和RANKL水平,升高护骨素(OPG)水平体外研究也表明,青藤碱可抑制RANKL诱导RAW264.7细胞形成破骨细胞及其骨吸收活性.研究发现,青藤碱能显著抑制RANKL诱导的RAW264.7细胞的NF-κB通路活化,包括NF-κ B基因转录活化I-κB磷酸化降解和p65核转位.此外,还发现青藤碱还能够降低RANKL诱导的RAW264.7细胞Ca2+内流及丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)通路分子中p38和JNK磷酸化.通过荧光报道基因,我们观察到青藤碱能显著抑制核转录因子NF-AT和AP-1的转录表达.最后,实时定量PCR证实青藤碱对于一系列RANKL刺激的破骨细胞相关基因活化具有剂量依赖性抑制作用,包括TRAF6,NF-ATc1,C-Fos,Far-1,Far-2,cathepsin K,intergrin alpha-V/beta-3,MMP-9和C-src.综上所述,我们推测青藤碱通过干扰RANKL信号通路抑制Mt诱导佐剂性关节炎大鼠骨破坏及破骨细胞形成.