基于新型可视化生物传感技术的汞暴露高通量生物监测体系的构建

被引量 : 0次 | 上传用户:lixuechao0926
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的基于合成生物学及代谢工程手段,构建响应汞的四色全细胞生物传感器,应用于汞职业暴露人群的尿汞检测,建立汞暴露高通量生物监测体系用于汞中毒的快速筛查。材料和方法以天然的汞抗性mer操作子为设计蓝本,搭建了紫色杆菌素及其中间体的vioABCDE/vioABCE/vioABDE/vioABE合成基因簇,并置于汞响应的MerR调控蛋白的下游,开发汞全细胞生物传感器。通过对四种不同输出信号的传感器的色素稳定性、时间-响应关系、剂量-响应关系、金属选择性等性能的测试,优化传感器遗传学组件。进一步将此传感器应用于汞职业暴露人群尿汞的定性及定量检测,探索替代肌酐检测进行校正的做法,建立汞中毒的快速筛查方法。结果 1.4种色素信号的汞生物传感器的构建:基于大肠杆菌底盘,成功构建了以紫色(deoxyviolacein,DV)、深蓝色(violacein,V)、绿色(prodeoxyviolacein,PDV)、蓝色(proviolacein,PV)四种呈色化合物为可视化信号的全细胞生物传感器。2.四种传感器性能考察:DV>V>PDV≈PV。DV和V的最佳检测时间均为4 h,对除汞外的多种金属无响应。DV的检测限(limit of detection,LOD)(0.024 nmol·L-1)低于V的LOD(0.687 nmol·L-1),对汞的线性响应范围(0.732~23.4 nmol·L-1,R~2=0.984)较V(0.74~5.94 nmol·L-1,R~2=0.948)更宽。后续尿汞检测选用DV作为传感信号。3.尿汞的定性及定量检测:不同肌酐含量的尿液、纯化水以及人工尿液的基质效应差异显著;优化后确定尿液添加量为10%,LOD为0.086 nM,线性响应范围为1.57~100 nmol·L-1,R~2=0.989。4.汞中毒快筛方法建立:总检测时间为4 h,无需肌酐校正,利用96孔板可进行高通量快速筛查,超过职业性汞接触限值的检出率为85%,假阴性为7%。结论基于紫色杆菌素分支代谢途径,构建了4种不同输出信号的全细胞传感器,经检测体系性能优化后可用于尿汞的定性及定量检测,并成功建立了职业性汞中毒的高通量筛查方法。
其他文献
介绍了智慧医疗的相关概念,分析了日间化疗患者延续性护理的重要性,阐述了智慧医疗在日间化疗患者延续性护理中的应用效果,以期为促进我国日间化疗的护理管理朝着科学化、信息化、智能化的方向发展提供参考。
期刊
素质教育的话题已经谈论近10年了。课堂教学是实施素质教育的主要途径,也基本成为人们的共识。所以如何改革课堂教学,就成了问题的焦点。知识教学始终是课堂教学的核心任务。可是,什么是知识?什么是知识教学?“什么知识最有价值?”这是教育学中的一个经典问题。怎...
期刊
报纸
大食物观和粮食安全是我国粮食经济中密切联系的两个重要内容,如何科学认识大食物观视角下粮食安全问题,对于做好我国粮食安全工作具有重要意义。本文首先系统梳理了我国粮食安全问题的历史演变,分析了大食物观背景下我国粮食安全的新思维,提出了全范围夯实粮食安全根基的主要措施。研究表明:改革开放以来我国粮食安全经历了改善、波动、挑战、有力保障和稳中求进五个阶段;在大食物观背景下,粮食安全工作需要有系统性的新思维
期刊
报纸
<正>首先要说明一下,所谓"转型"并不是急转弯,而是历史发展的一种新要求、新趋势;"转型"也不是空穴来风的臆想。而是长期发展变化因素的积累,孕育着跃上一个新台阶。为什么现在提出"教师培训的历史转型"这个命题?因为世界变了。首先,社会变了。从农业文明到工业文明,再到信息文明,带来了知识本位、创新驱动的新时代。互联网、云技术、大数据、移动通讯、智能机器,深刻改变着人类的生产方式、生活方式、交往方式和
期刊
分析通督调神针法的理论内涵,探讨其对卒中后失眠的应用机理:以心-脑-肾轴为枢机,沟通元神,达到形神合一的状态。心脑共主神明,安神应心脑皆重,督脉作为中间桥梁沟通了脏腑、经气及元神,突出督脉在调神中的重要地位。分析各医家运用通督调神针法治疗脑卒中后睡眠障碍(Post-stroke sleep disorders, PSSD)的临床案例,对不同病因引起的卒中后失眠,分别通过调营卫、畅气血、化痰瘀、疏肝
期刊
目的 调查我院心源性脑卒中患者中利伐沙班临床使用剂量及对指南推荐剂量的相符率,并评价不同剂量利伐沙班的疗效与安全性。方法 回顾性分析2017年1月1日至2021年12月31日间复旦大学附属华山医院神经内科使用利伐沙班的心源性脑卒中患者的病历资料,根据其处方剂量分为15~20 mg·d-1剂量组和5~10 mg·d-1剂量组,并通过电话随访的方式,收集比较两组患者出院后3个月临床结局、不良反应及用药
期刊
<正>2022年3月,习主席在出席十三届全国人大五次会议解放军和武警部队代表团全体会议时指出,要贯彻依法治军战略,提高国防和军队建设法治化水平,为推进强军事业提供坚强法治保障。军队法治教育作为依法治军战略系统工程的一个基础环节,必须适应新形势新要求,更新完善教育理念,增强我军法治教育的科学性、系统性和实效性。一、当前军队基层法治教育存在的问题新时代赋予军队法治教育新的时代内涵。2015年中央军委印
期刊
报纸