四维核酸杂交技术[1](4DH),即在传统核酸杂交三维空间(XYZ:表征 DNA 片段的长度、碱基组成和碱基的排列)的基础上引入温度作为第四位参数所构成的四维温度空间平台上建立的核酸杂交技术。采用四维杂交技术,必须使用四维杂交反应试剂。过去使用的 PCR 过程结束后立即进行温度扫描分析熔解曲线的方法,得山的特征熔点温度 Tmp 值,单管反应过程的再重复性不好。加入四维杂交反应试剂后,结果稳定,单管反应过程的再重复性非常好。而且可以让 PCR 的 TaqMan 探针模式结果做熔解曲线分析!排除掉假阳性信号。这是因为一般 PCR 商业试剂盒反应液是针对聚合酶的特异活性优化而来的最佳反应条件,这个最佳反应只是对聚合酶的扩增反应是最优化的,对核酸杂交反应不一定是最佳反应条件!而四维杂交反应试剂是针对核酸杂交反应的特异性而进行最优化后得到的条件,更适合于核酸杂交反应。创新的四维杂交试剂可以直接测量短至8～16个碱基寡核苷酸片段的 Tmp 值;可以让定性 PCR 不开盖就可检测结果,避免可能存在的外来污染影响:可以方便简捷地利用来作为实时荧光定量 PCR 仪几何形状温度均匀性的质量控制。